IP-质谱寻找蛋白质的翻译后修饰

IP-质谱寻找蛋白质的翻译后修饰-详情进行免疫沉淀（IP）后得到的蛋白质可以通过各种方法技术进行进一步的分析，对其基本特征进行表征，如相对分子质量、含量、翻译后修饰方式以及氨基酸序列等。在多种分析方法中质谱技术凭借其高分辨率、高灵敏度以及高准确性等优势已成为IP蛋白分析的有力工具。翻译后修饰（post-translational modifications，PTMs）的IP蛋白在特定的氨基酸位点结合了相应的官能基团，因此相较于没有发生修饰的IP

N-糖蛋白的糖链鉴别及相对含量测定

N-糖蛋白的糖链鉴别及相对含量测定-详情糖基化修饰是细胞中zuì普遍的翻译后修饰方式之一，通过共价结合糖链影响蛋白的结构、活性以及定位等使蛋白具有多种多样的生物学功能，参与调节不同的生命活动进程。根据所结合的糖链的类型可以将其分为N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化将N-聚糖共价连接到蛋白质特殊氨基酸序列的天冬酰胺残基上，是生物药物尤其是单克隆抗体上zuì广为人知的糖基化形式。 N-聚糖结构通过影响药代动力学、药效学

n糖基化分子量

n糖基化分子量-详情N糖基化蛋白的相对分子质量为原来蛋白质的相对分子质量加上其共价结合的N糖链的相对分子质量。N糖基化蛋白的相对分子质量在一定程度上可以作为糖链结构鉴定的依据，用于判断糖链的结构正确与否。N糖基化蛋白的相对分子质量可以通过SDS-PAGE、HPLC以及质谱法进行测定。质谱法具有检测结果更加准确、灵敏和直观的优点，已成为各类化合物分子质量分析的强有力工具。基质辅助激光解吸电离飞行质谱（MALDI-TOF-MS）可

O-聚糖的分析策略

O-聚糖的分析策略-详情糖蛋白中的O-聚糖分析是糖组学研究中的重要内容。O糖基化修饰分析研究的主要内容通常包括鉴定发生O-糖基化修饰的氨基酸类型以及该氨基酸在肽链中所处的位置、O-聚糖的结构以及含量等。当前主要利用生物质谱技术结合专一性的糖苷内切酶的作用来实现，分析策略和流程大致包括：（1）O-聚糖的酶解释放；（2）液相色谱纯化富集O-聚糖肽；（3）质谱检测以及数据解析。O聚糖分析第yī步就是利用酶解消化将糖链从糖

SDS-PAGE检测蛋白质含量

SDS-PAGE检测蛋白质含量-详情蛋白质含量鉴定是蛋白质组学研究中的重要内容，也是进行某些后续分析的前提，如进行差异蛋白的筛选前就必须对蛋白的含量进行精确的鉴定。目前鉴定蛋白质含量的方法主要有经典的凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、双缩脲法、紫外吸收法以及新发展起来的基于质谱的方法等。SDS-PAGE十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳是基于蛋白质分子质量进行蛋白分离的分析技术。根据蛋白质的分子质量将其分离为不同的蛋白条带

SDS-PAGE检测宿主蛋白HCP残留

SDS-PAGE检测宿主蛋白HCP残留-详情HCP（host cell protein ）宿主细胞蛋白或称宿主蛋白残留，是生物制药过程中来源于宿主生物体的药物产品中的低水平的蛋白质杂质。在重组蛋白药物的表达过程中，宿主细胞系统可以表达许多内源性蛋白质，这些重组生物治疗药物中的宿主细胞蛋白会显著影响药物疗效并引起机体发生免疫反应，存在潜在的风险性，因此必须对这类药物进行严格的质量管控。宿主蛋白残留检测就是检测重组蛋白药物中是否含有

SEC分子筛

SEC分子筛-详情SEC体积排阻色谱是一种以多孔树脂颗粒作为填充物的液相色谱技术，这种多孔的树脂颗粒就像一个分子筛，能起到过滤分离的作用。当样品溶液流经色谱柱时，体积大于孔径的分子不能进入孔隙，只能从树脂间隙洗脱，洗脱路径较短；而体积在孔径大小之间的分子会不同程度的渗透到孔隙中，洗脱路径相对较长；体积小于zuì小孔径的分子能渗透进不同的各种大小不一的孔隙，洗脱路径zuì长。因此，大小不同的各种分子洗脱所需的

swath-dia

swath-dia-详情DIA（Data Independent Acquisition）数据独立采集模式或称数据非依赖型采集模式是在传统的数据依赖型采集模式（DDA）上发展起来的一种新的质谱数据采集方式。在典型的蛋白质组学质谱分析中，蛋白质分离物被消化成胰蛋白酶肽，然后通过液相色谱-质谱进行分析。DIA循环通过一组预定义的肽前体分离窗口，以400-1200m/z的速度穿过整个液相色谱梯度。隔离窗内的所有肽被同时片段化，并通过串联质谱检测。通过将质谱中的

TMT标记的定量磷酸化蛋白组学

TMT标记的定量磷酸化蛋白组学-详情TMT（Tandem Mass Tag）串联质量标签是一种基于体外肽标记的蛋白质定量技术，旨在使用串联质谱MS对不同样品中的蛋白质进行鉴定和定量。TMT定量技术将蛋白质利用TMT试剂进行标记，所有TMT试剂标签具有相同的质量，由氨基反应基团、质量平衡基团和质量报告基团组成，其中质量平衡基团和质量报告基团的分子量各不相同。因此，被TMT标记的不同来源的蛋白肽段在一级质谱中表现出相同的质荷比；在二级质

标签实验和免疫共沉淀

标签实验和免疫共沉淀-详情标签实验和免疫共沉淀是两种不同的概念，免疫共沉淀（Co-IP）是一种具体的实验技术，而标签实验指的是基于化学/生物试剂或同位素标记的一类实验的总称，两者属于包含于被包含的关系，免疫共沉淀是一种基于标签的研究蛋白质相互作用的实验技术。免疫共沉淀基于免疫学的原理，利用结合在Argarose Beads上的蛋白质A作为抗体，去识别并结合生理条件下相互作用的蛋白质B-C，形成蛋白A-B-C复合物，使蛋白质B和

测定蛋白混合物中蛋白含量用哪种质谱

测定蛋白混合物中蛋白含量用哪种质谱-详情质谱技术有不同的数据采集模式：全扫描模式（Full Scan）、单离子监测模式（Single Ion Monitor，SIM）以及选择反应监测模式（Selective Reaction Monitor，SRM）或称多反应监测模式（Multi Reaction Monitor，MRM），其工作的原理不同使其适用于不同的分析。全扫描模式对设定范围内的所有碎片离子进行扫描，获取其质谱信息，更适用于对未知蛋白质进行定性分析。对于蛋白质定量分析则更倾

差异代谢物分析

差异代谢物分析-详情差异代谢物指不同生理病理状态、药物治疗情况下机体产生的不同浓度和比例的内源代谢物，是外源物质、疾病、药物或遗传变异与生命体相互作用的产物，研究差异代谢物可以从本质上了解某一生物表型或生理状态间的差异。通常利用OPLS-DA模型基于相关系数（Correlation Coefficient）以及VIP （Variable importance in the projection）指标进行差异代谢产物筛选，因为这种方法所有跟分组相关的信息都集中在第yī维

肠道代谢组学

肠道代谢组学-详情肠道代谢组学又称肠道微生物代谢组学，是研究机体肠道内所有微生物及其代谢物的科学。人体肠道内分布有高达100万亿个细菌，其数量接近自身细胞的10倍，基因组总量约为自身基因数目的150倍，有人体“第二基因组”之称，肠道的微生物菌群也被称为人体另一个“器官”。肠道微生物主要通过其小分子代谢物与宿主进行密切的信息交流和相互作用，在代谢、免疫、疾病以及神经系统发展和调控中起到了重要作用，影响着宿主

电子电离

电子电离-详情电子电离（Electron ionization，EI），也称为电子碰撞电离和电子轰击电离，是用于鉴定给定有机化合物的zuì有效的质谱方法之一的基础。它是一种电离方法，其中高能电子与固相或气相中的原子或分子相互作用而产生离子。由于该技术使用高能电子来产生离子，因此被认为是硬电离方法（高碎片化）。这会导致广泛的碎裂，从而有助于未知化合物的结构测定。EI可用于分子量小于600的有机化合物分析。此外，当与各种分离方法

化学电离

化学电离-详情化学电离（Chemical ionization，CI）是一种软电离技术，是分子和离子反应的研究结果在分析化学中的直接应用。CI始于20世纪50年代，产生的碎片很少，在分析化学中具有巨大的潜力。在化学电离过程中，电子shǒu先轰击试剂气体以生成试剂离子。样品分子随后通过分子和离子反应途径被试剂离子电离。20世纪70年代被认为是化学电离发展的一个里程碑。当时，研究人员解决了化学电离需要在真空环境下工作这一缺点，使化学电

快速原子轰击

快速原子轰击-详情快速原子轰击（Fast atom bombardment，FAB）是1981年建立的一种电离技术，在质谱系统中被广泛用作离子源。与其他电离技术不同，快速原子轰击用一个中性原子（Xe，Ar）轰击样品使样品电离。中性原子的使用避免了jué缘样品中电荷的积累，并促进了样品的电离。快速原子轰击可以成功地确定不是挥发性或衍生化的化合物，以及一些高分子化合物。而且，快速原子轰击对于测定寡糖、寡肽、寡核苷酸、和热不稳定的有机化

基质辅助激光解吸电离

基质辅助激光解吸电离-详情基质辅助激光解吸电离（MALDI）是一种质谱软电离技术，MALDI使用激光能量吸收基质以zuì小碎片化的方式从大分子中产生离子。它已被广泛用于测量生物大分子的分子量，例如肽、蛋白质、核酸、聚合物的分子量分布以及低聚物分析。MALDI质谱具有灵敏度高、适用范围广、操作简单的特点。它将以小分子研究为主的传统质谱技术扩展到分析高jí性、不易挥发、热不稳定的样品范围。MALDI方法分为三个步骤。shǒu先

电喷雾电离

电喷雾电离-详情电喷雾电离（Electrospray ionization，ESI）是一种使用电喷雾向液体施加高电压产生气溶胶来产生用于质谱分析的离子的技术。由于生物大分子相对易碎，它们的结构在解离和电离过程中很容易被破坏。电喷雾电离则克服了这些分子在电离时碎裂的趋势。电喷雾电离与其他大气压电离过程不同，电喷雾电离可能会产生多电荷离子，这有效地扩展了分析仪的质量范围，以适应所观察到kDa-mDa的蛋白质及其相关肽的大小。电喷雾电离

大气压光电离

大气压光电离-详情大气压光电离（Atmospheric pressure photoionization ionization，APPI）是一种用于液相色谱-质谱（LC-MS）的软电离技术，该技术使用光化学作用来电离气相中的样品。通过质谱，APPI有助于分析检测弱jí性和非jí性化合物。大气压光电离的原理在APPI中，来自液相色谱中的溶剂和样品shǒu先形成气态分析物（M），气态分析物被离子化与光源发出的光子相互作用，然后离子被引入质谱仪中进行分析。在此过程中，分析物

大气压化学电离

大气压化学电离-详情大气压化学电离（Atmospheric pressure chemical ionization，APCI）是一种新的电离方法，主要作为高效液相色谱和质谱分析中的一个连接技术。大气压化学电离具有广泛的电离范围、高灵敏度和高选择性的特点。它与液相色谱的高效分离能力相匹配，使液相色谱-大气压化学电离质谱成为生物和环境化学领域中的一种标准分析技术。大气压化学电离的原理APCI的示意图在气体辅助下，溶剂和样品流经进样器。溶剂和样品在进