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  • SEC分子筛

    SEC分子筛

    SEC分子筛-详情SEC体积排阻色谱是一种以多孔树脂颗粒作为填充物的液相色谱技术,这种多孔的树脂颗粒就像一个分子筛,能起到过滤分离的作用。当样品溶液流经色谱柱时,体积大于孔径的分子不能进入孔隙,只能从树脂间隙洗脱,洗脱路径较短;而体积在孔径大小之间的分子会不同程度的渗透到孔隙中,洗脱路径相对较长;体积小于zuì小孔径的分子能渗透进不同的各种大小不一的孔隙,洗脱路径zuì长。因此,大小不同的各种分子洗脱所需的

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  • swath-dia

    swath-dia

    swath-dia-详情DIA(Data Independent Acquisition)数据独立采集模式或称数据非依赖型采集模式是在传统的数据依赖型采集模式(DDA)上发展起来的一种新的质谱数据采集方式。在典型的蛋白质组学质谱分析中,蛋白质分离物被消化成胰蛋白酶肽,然后通过液相色谱-质谱进行分析。DIA循环通过一组预定义的肽前体分离窗口,以400-1200m/z的速度穿过整个液相色谱梯度。隔离窗内的所有肽被同时片段化,并通过串联质谱检测。通过将质谱中的

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  • TMT标记的定量磷酸化蛋白组学

    TMT标记的定量磷酸化蛋白组学

    TMT标记的定量磷酸化蛋白组学-详情TMT(Tandem Mass Tag)串联质量标签是一种基于体外肽标记的蛋白质定量技术,旨在使用串联质谱MS对不同样品中的蛋白质进行鉴定和定量。TMT定量技术将蛋白质利用TMT试剂进行标记,所有TMT试剂标签具有相同的质量,由氨基反应基团、质量平衡基团和质量报告基团组成,其中质量平衡基团和质量报告基团的分子量各不相同。因此,被TMT标记的不同来源的蛋白肽段在一级质谱中表现出相同的质荷比;在二级质

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  • 标签实验和免疫共沉淀

    标签实验和免疫共沉淀

    标签实验和免疫共沉淀-详情标签实验和免疫共沉淀是两种不同的概念,免疫共沉淀(Co-IP)是一种具体的实验技术,而标签实验指的是基于化学/生物试剂或同位素标记的一类实验的总称,两者属于包含于被包含的关系,免疫共沉淀是一种基于标签的研究蛋白质相互作用的实验技术。免疫共沉淀基于免疫学的原理,利用结合在Argarose Beads上的蛋白质A作为抗体,去识别并结合生理条件下相互作用的蛋白质B-C,形成蛋白A-B-C复合物,使蛋白质B和

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  • 测定蛋白混合物中蛋白含量用哪种质谱

    测定蛋白混合物中蛋白含量用哪种质谱

    测定蛋白混合物中蛋白含量用哪种质谱-详情质谱技术有不同的数据采集模式:全扫描模式(Full Scan)、单离子监测模式(Single Ion Monitor,SIM)以及选择反应监测模式(Selective Reaction Monitor,SRM)或称多反应监测模式(Multi Reaction Monitor,MRM),其工作的原理不同使其适用于不同的分析。全扫描模式对设定范围内的所有碎片离子进行扫描,获取其质谱信息,更适用于对未知蛋白质进行定性分析。对于蛋白质定量分析则更倾

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  • 差异代谢物分析

    差异代谢物分析

    差异代谢物分析-详情差异代谢物指不同生理病理状态、药物治疗情况下机体产生的不同浓度和比例的内源代谢物,是外源物质、疾病、药物或遗传变异与生命体相互作用的产物,研究差异代谢物可以从本质上了解某一生物表型或生理状态间的差异。通常利用OPLS-DA模型基于相关系数(Correlation Coefficient)以及VIP (Variable importance in the projection)指标进行差异代谢产物筛选,因为这种方法所有跟分组相关的信息都集中在第yī维

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  • 肠道代谢组学

    肠道代谢组学

    肠道代谢组学-详情肠道代谢组学又称肠道微生物代谢组学,是研究机体肠道内所有微生物及其代谢物的科学。人体肠道内分布有高达100万亿个细菌,其数量接近自身细胞的10倍,基因组总量约为自身基因数目的150倍,有人体“第二基因组”之称,肠道的微生物菌群也被称为人体另一个“器官”。肠道微生物主要通过其小分子代谢物与宿主进行密切的信息交流和相互作用,在代谢、免疫、疾病以及神经系统发展和调控中起到了重要作用,影响着宿主

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  • 电子电离

    电子电离

    电子电离-详情电子电离(Electron ionization,EI),也称为电子碰撞电离和电子轰击电离,是用于鉴定给定有机化合物的zuì有效的质谱方法之一的基础。它是一种电离方法,其中高能电子与固相或气相中的原子或分子相互作用而产生离子。由于该技术使用高能电子来产生离子,因此被认为是硬电离方法(高碎片化)。这会导致广泛的碎裂,从而有助于未知化合物的结构测定。EI可用于分子量小于600的有机化合物分析。此外,当与各种分离方法

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  • 化学电离

    化学电离

    化学电离-详情化学电离(Chemical ionization,CI)是一种软电离技术,是分子和离子反应的研究结果在分析化学中的直接应用。CI始于20世纪50年代,产生的碎片很少,在分析化学中具有巨大的潜力。在化学电离过程中,电子shǒu先轰击试剂气体以生成试剂离子。样品分子随后通过分子和离子反应途径被试剂离子电离。20世纪70年代被认为是化学电离发展的一个里程碑。当时,研究人员解决了化学电离需要在真空环境下工作这一缺点,使化学电

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  • 快速原子轰击

    快速原子轰击

    快速原子轰击-详情快速原子轰击(Fast atom bombardment,FAB)是1981年建立的一种电离技术,在质谱系统中被广泛用作离子源。与其他电离技术不同,快速原子轰击用一个中性原子(Xe,Ar)轰击样品使样品电离。中性原子的使用避免了jué缘样品中电荷的积累,并促进了样品的电离。快速原子轰击可以成功地确定不是挥发性或衍生化的化合物,以及一些高分子化合物。而且,快速原子轰击对于测定寡糖、寡肽、寡核苷酸、和热不稳定的有机化

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  • 基质辅助激光解吸电离

    基质辅助激光解吸电离

    基质辅助激光解吸电离-详情基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种质谱软电离技术,MALDI使用激光能量吸收基质以zuì小碎片化的方式从大分子中产生离子。它已被广泛用于测量生物大分子的分子量,例如肽、蛋白质、核酸、聚合物的分子量分布以及低聚物分析。MALDI质谱具有灵敏度高、适用范围广、操作简单的特点。它将以小分子研究为主的传统质谱技术扩展到分析高jí性、不易挥发、热不稳定的样品范围。MALDI方法分为三个步骤。shǒu先

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  • 电喷雾电离

    电喷雾电离

    电喷雾电离-详情电喷雾电离(Electrospray ionization,ESI)是一种使用电喷雾向液体施加高电压产生气溶胶来产生用于质谱分析的离子的技术。由于生物大分子相对易碎,它们的结构在解离和电离过程中很容易被破坏。电喷雾电离则克服了这些分子在电离时碎裂的趋势。电喷雾电离与其他大气压电离过程不同,电喷雾电离可能会产生多电荷离子,这有效地扩展了分析仪的质量范围,以适应所观察到kDa-mDa的蛋白质及其相关肽的大小。电喷雾电离

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  • 大气压光电离

    大气压光电离

    大气压光电离-详情大气压光电离(Atmospheric pressure photoionization ionization,APPI)是一种用于液相色谱-质谱(LC-MS)的软电离技术,该技术使用光化学作用来电离气相中的样品。通过质谱,APPI有助于分析检测弱jí性和非jí性化合物。大气压光电离的原理在APPI中,来自液相色谱中的溶剂和样品shǒu先形成气态分析物(M),气态分析物被离子化与光源发出的光子相互作用,然后离子被引入质谱仪中进行分析。在此过程中,分析物

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  • 大气压化学电离

    大气压化学电离

    大气压化学电离-详情大气压化学电离(Atmospheric pressure chemical ionization,APCI)是一种新的电离方法,主要作为高效液相色谱和质谱分析中的一个连接技术。大气压化学电离具有广泛的电离范围、高灵敏度和高选择性的特点。它与液相色谱的高效分离能力相匹配,使液相色谱-大气压化学电离质谱成为生物和环境化学领域中的一种标准分析技术。大气压化学电离的原理APCI的示意图在气体辅助下,溶剂和样品流经进样器。溶剂和样品在进

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  • 成像分析

    成像分析

    成像分析-详情凝胶电泳技术是一种重要的分离分析技术,目前已发展有多种不同的凝胶电泳技术,如SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、IEF(等电聚焦电泳)、2-DE(二维电泳)以及2D Blue Native/SDS-PAGE等,不同的电泳技术根据样品物质的不同理化参数进行电泳分离,也可以将不同的电泳技术结合起来对样品进行多个维度的分离。在凝胶电泳实验当中,凝胶图像的分析是zuì后也是zuì关键的一步,其分析结果直接影响到整个

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  • 纯蛋白分子筛

    纯蛋白分子筛

    纯蛋白分子筛-详情蛋白纯化是蛋白质组学研究的重要内容,要研究一个蛋白质,shǒu先要将其从生物样品中分离纯化出来。蛋白质的纯度对后续的蛋白质研究也至关重要,含有杂质的样品往往会导致不准确的分析结果。蛋白纯化主要是依据蛋白质的相似性和差异性来开展的,根据蛋白质的相似性可以将蛋白质与非蛋白质区分开来,而不同的蛋白质的分子量和形状等差异可以作为进一步分离的依据。常用的蛋白质纯化方法大多都是基于色谱的技术,根

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  • 纯度、等电点、蛋白浓度

    纯度、等电点、蛋白浓度

    纯度、等电点、蛋白浓度-详情蛋白质纯度、等电点以及浓度是蛋白质分析中重要的理化参数。蛋白纯度在各种蛋白质组学分析中十分重要,纯度越高的蛋白样品实验结果的可靠性越高。等电点是蛋白质基本的特征参数,指蛋白质溶解度zuì低时溶液的pH值,不同的蛋白质等电点也不同。蛋白质的浓度可以用于计算一定量的溶液中蛋白质的含量。蛋白纯度、等电点以及浓度的测定方法各有不同。常用的蛋白纯度测定方法主要有凝胶电泳法、基于色谱的

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  • 纯度SEC检测

    纯度SEC检测

    纯度SEC检测-详情SEC(Size exclusion chromatography)分子筛色谱也称凝胶过滤色谱或尺寸/体积排阻色谱,是一种zuì温和、zuì简单的液相色谱分离技术,在组织提取液、核酸、蛋白质以及多肽等物质的分离纯化中广泛应用。分子筛色谱主要由色谱柱和检测器构成,色谱柱的填充物为多孔的球形颗粒材料,这种材料能起到像分子筛一样的过滤作用。分子质量较大的物质被排阻在孔外,随流动相从颗粒的间隙中流出色谱柱,洗脱路径和时间较短

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  • 打质谱鉴定的是混合蛋白还是单个蛋白

    打质谱鉴定的是混合蛋白还是单个蛋白

    打质谱鉴定的是混合蛋白还是单个蛋白-详情质谱技术是蛋白质组学分析中zuì主流zuì常用的技术,将蛋白质样品进行质谱分析俗称“打质谱”可以实现多种蛋白分析,包括相对分子质量、空间结构、氨基酸组成和排列顺序、含量、翻译后修饰类型和修饰位点鉴定以及蛋白质相互作用分析等。单一的蛋白质和复杂混合蛋白质样品都可以进行质谱分析,分析的原理也相同,大致流程包括:(1)将蛋白质样品多重酶切为小分子肽段;(2)液相色谱分离

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  • 打质谱鉴定泛素化位点

    打质谱鉴定泛素化位点

    打质谱鉴定泛素化位点-详情泛素(Ubiquitin,Ub)是一种小分子量多肽,在相关酶的作用下,Ub能通过共价键连接在底物蛋白或目标蛋白上,这一过程就称为蛋白泛素化修饰,是真核生物中一种常见的蛋白翻译后修饰。根据蛋白所连接的泛素分子的多少,可以将泛素化分为单泛素化和多泛素化,根据Ub所在的位置又将多泛素化分为多聚泛素化和线形多聚泛素化。因此,一个蛋白质可能有多个泛素化修饰位点,且每个位点可能连接不止有一个泛素分子

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