HPLC蛋白纯度
HPLC蛋白纯度-详情HPLC(High Performance Liquid Chromatography)高效液相色谱法,也称为高压液相色谱,是一种用于分离、鉴定和量化混合物中的每种成分的分析化学技术。它依靠高压泵将含有样品混合物的液体通过充满固体吸附材料的色谱柱,样品中的每种成分与吸附材料的相互作用略有不同,导致不同成分的流速不同,并导致成分在流出色谱柱时发生分离。蛋白质纯度是蛋白质分析研究中一个重要的理化参数,不纯的蛋白质样本可能会导
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2023-09-11 09:30
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蛋白质翻译后修饰的检测方法
蛋白质翻译后修饰的检测方法-详情质谱是蛋白质翻译后修饰检测的常用技术之一,可以用于已知和未知的翻译后修饰检测。百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白质翻译后修饰分析和翻译后修饰蛋白组分析服务。蛋白质翻译后修饰检测蛋白质翻译后修饰(post-translational modifications,PTMs),如磷酸化、乙酰化、泛素化、SUMO化、糖基化等,大幅度的增加了蛋白质组的复杂性。检测蛋白质的翻译后修饰,了解它们如何工作、影响蛋白质组和
HPLC多肽分子量测定
HPLC多肽分子量测定-详情分子量是化合物的基本理化参数,指组成化合物的各原子的相对原子质量之和,也是蛋白质/多肽的重要特征参数之一,在蛋白质/多肽的鉴定中扮演着十分重要的角色,分子质量的正确与否也是判断其结构正确与否的一个重要指标。常用的蛋白质/多肽的分子量鉴定方法包括SDS-凝胶电法、粘度法、凝胶渗透色谱法、凝胶过滤层析法以及质谱法等。凝胶渗透色谱法(Gel Permeation Chromatography,GPC)和凝胶过滤层析法(
亚细胞蛋白质组学
亚细胞蛋白质组学-详情细胞内核酸编码的蛋白质的分布和分区发育可实现特定的细胞功能。因此,就其亚区室的蛋白质表达进行分析,对细胞蛋白质组来说是一种既实用又很有必要的功能检测方法。亚细胞分离与质谱蛋白质鉴定技术强强联合,帮助我们开发出可用于表征亚细胞水平蛋白质组学方法。亚细胞蛋白质组学建立在数十年生化研究的基础上,已经能够实现对亚细胞的分离。密度、尺寸和电荷分离等相关技术的进步,也使亚细胞结构的分离能
糖基化修饰种类和原理介绍
糖基化修饰种类和原理介绍-详情导读• 糖基化修饰介绍• 糖基化修饰功能• 糖基化修饰在细胞中生成、加工过程• 两种主要糖基化类型介绍:O-和N-糖基化一、 糖基化修饰蛋白质的糖基化是一种常见的蛋白翻译后修饰,是在糖基转移酶作用下将糖类转移至蛋白质和蛋白质上特殊的氨基酸残基形成糖苷键的过程。研究表明70%人类蛋白包含一个或多个糖链1%的人类基因组参与了糖链的合成和修饰。二、糖基化修饰功能在参与糖基化形成的过程中,糖
IP胶条测序
IP胶条测序-详情蛋白混合物进行免疫沉淀反应(IP)后,可以得到与目标蛋白相互作用的靶蛋白,此时一般需要对靶蛋白进行进一步的鉴定,如分子量、含量、翻译后修饰以及一级结构表征等,以全面了解靶蛋白的相关信息。凝胶电泳是检测分子量zuì简单的方法,将IP免疫沉淀获得的靶蛋白进行凝胶电泳,电泳结束后蛋白胶条所处的位置对应的Maker的大小就是该靶蛋白的分子质量,此时如还要进行靶蛋白一级结构分析,可以将该蛋白胶条进行回收
iTRAQ差异蛋白筛选
iTRAQ差异蛋白筛选-详情差异蛋白筛选是差异蛋白组学研究的主要内容之一,主要是筛选不同处理条件下各样本间或同一样本不同时期表达水平存在显著差异的蛋白质,旨在寻找和筛选有意义的差异蛋白,揭示生命活动规律、生物体的调控机理以及响应外界刺激的信号通路等。已知的蛋白含量是进行差异蛋白筛选的前提条件,因此对样本的各蛋白组分进行精确定量至关重要。iTRAQ(同位素标记相对和jué对定量)是一种基于标签的蛋白质质谱定量技
蛋白糖基化水平检测
蛋白糖基化水平检测-详情蛋白糖基化水平检测是对糖基化蛋白质进行定量或者对目的蛋白的糖基化程度进行检测。百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白质糖基化水平检测服务。蛋白质糖基化检测蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰,它与生物体的许多生命活动密切相关。糖基化蛋白代表着大多数细胞表面标记物和分泌性蛋白。糖基化蛋白的研究有利于鉴定疾病的生物学标志和治疗靶点,发现潜在的治疗靶点,并为疾病诊断提供帮助。蛋白糖基化
ITS区域全长序列
ITS区域全长序列-详情ITS(internal transcribed space)是存在于真核生物中的一段rDNA转录间隔区。rDNA是编码核糖体RNA(rRNA)的基因,由转录区和非转录区组成,转录区包括18S、5.8S和28S rDNA基因,内转录间隔区ITS位于18S和5.8S rDNA之间以及5.8S和28S rDNA之间。ITS序列长度适中,从酵母到人类的各种真核生物中,ITS的序列长度在300-1000bp之间不等。其序列进化速度快,在不同种属物种之间具有一定的特异性,将其进行PCR扩增
糖蛋白组学定量分析
糖蛋白组学定量分析-详情质谱是蛋白质组学研究的主要技术之一,可用于翻译后修饰蛋白质组的定性和定量,包括糖蛋白组学的定量分析。百泰派克生物科技提供基于质谱的糖基化定量蛋白组学研究的服务。糖蛋白组学定量分析糖蛋白组学定量分析指从组学水平对糖基化蛋白质进行定量分析。糖基化蛋白质即糖蛋白,指含有共价结合于氨基酸侧链的寡糖链(聚糖)的蛋白质。碳水化合物以共翻译或翻译后修饰的方式附着到蛋白质上的过程称为糖基化
ITS全序列与18S全序列
ITS全序列与18S全序列-详情真核生物rDNA基因编码核糖体RNA(rRNA),rDNA基因由转录区和非转录区组成,转录区包括5S、5.8S、18S和28S rDNA,分别编码5S、5.8S、18S和28S rRNA,在转录区的各rDNA之间还存在一段内转录间隔区ITS。ITS(internal transcribed space)序列是真核生物rDNA基因的内转录区域,存在于18S和5.8S rDNA以及5.8S和28S rDNA之间。其长度和序列在不同种属之间具有一定的多态性,是一段既保守又具有特异
蛋白质测序常见问题汇总(一)
蛋白质测序常见问题汇总(一)-详情蛋白质研究常常涉及到蛋白质鉴定以及对蛋白质的序列研究,而刚接触蛋白测序方面的新手往往会遇到各种各样的问题,在这期小编给大家贴心汇总了有关蛋白质测序大家比较关心的一些问题,希望对大家了解蛋白质测序能有些许帮助。1-. 蛋白质测序和核酸测序的思路有什么不同?蛋白质无论Edman测序还是质谱测序法都是通过化学反应或者高能碰撞破碎共价键对氨基酸残基序列进行分析,因而会对蛋白质的化学
LC-MS怎么分析蛋白有没有磷酸化
LC-MS怎么分析蛋白有没有磷酸化-详情蛋白磷酸化就是在酶的作用下蛋白质的特定氨基酸共价结合磷酸基团的过程。发生了磷酸化修饰的蛋白质比没有发生修饰的蛋白质分子质量增加了磷酸基团的质量,液相色谱串联质谱技术(LC-MS)就是通过分析这种分子质量变化来判断蛋白是否发生磷酸化修饰。对于一个特定的已知序列得蛋白质,其分子质量是确定的,磷酸基团的分子质量也是已知的,通过质谱检测各肽段的分子质量,若其分子质量刚好增加了
基于Top down自上而下蛋白质组学
基于Top down自上而下蛋白质组学-详情蛋白质组学被认为是解读生物学问题的综合技术,它涉及一系列技术方法,包括质谱(MS)。通过MS进行蛋白质鉴定和表征的两种主要方法可归类为“自下而上”,即通过蛋白质水解消化来分析肽段,“自上而下”,指通过对破碎的完整蛋白质进行全局分析。(Toby T K, et al.; 2016)在Bottom up自下而上的蛋白质组学中,蛋白质在进入质谱分析之前需要先被消化成肽段,而Top down自上而下的蛋白质组学则
蛋白质测序常见问题汇总(二)
蛋白质测序常见问题汇总(二)-详情上期给大家汇总了一些有关蛋白质测序原理的基础知识,这期着重给大家列举一些蛋白质测序实验中新手可能想问的问题,希望对网接触蛋白质测序的实验新手在选择蛋白质测序方法上有指导性帮助。1-. 蛋白质样品纯度较高,有什么快速的蛋白质测序的方法吗?可以通过鉴定蛋白质的肽谱图(Peptide mass fingerprinting,PMF)达到快速测定蛋白质测序的目的。因为每个蛋白质的序列是特异的,经过特定酶切
LC-MS-MS法鉴定磷酸化位点
LC-MS-MS法鉴定磷酸化位点-详情蛋白磷酸化指蛋白质肽链上特定氨基酸共价结合磷酸基团的过程,结合磷酸基团的氨基酸的种类以及其处于多肽链中的位置就称为磷酸化位点。真核生物的磷酸化主要发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸等氨基酸残基上,而原核生物磷酸化主要发生在组氨酸、精氨酸和赖氨酸等残基上。利用液相色谱串联质谱技术LC-MS-MS鉴定磷酸化位点需要先鉴定发生磷酸化的肽段,在此基础上进行磷酸化位点分析。基于LC-MS-MS的磷酸
蛋白质的二级结构测定
蛋白质的二级结构测定-详情蛋白质的二级结构是指蛋白质主链折叠产生的由氢键维系的有规则的构象,包括三种zuì主要的结构原件,α螺旋(H)、β折叠子(E)和无规则卷曲(C)。蛋白质的二级结构是联系一级结构和三级结构的桥梁,所以二级结构的预测可为三级结构预测提供很好的起始条件。蛋白质二级结构检测的基本原理就是通过对结构已经测定的蛋白质序列和其二级结构对应关系的统计分析,归纳出一些预测规则,用于待测蛋白的二级结
转录和蛋白组学
转录和蛋白组学-详情生物体的遗传信息遵循中心表达法则,DNA中包含的遗传信息通过转录传递到mRNA,再通过翻译表达形成具有生物学功能的蛋白质。转录组就是在一定时期或生理条件下机体表达的全部mRNA,蛋白组则是在一定时期或生理条件下机体表达的全部蛋白质。转录组是连接基因组和蛋白组的中间状态。转录组和蛋白组联合分析,就是对转录组数据和蛋白质组数据进行关联分析,获取一定时期内机体mRNA和蛋白的表达情况,利用转录组和蛋
免疫沉淀IP
免疫沉淀IP-详情免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)技术是一种基于抗体和抗原特异性结合原理开发的用来检测、分离、纯化蛋白质以及研究蛋白互作的方法。免疫沉淀IP技术利用结合抗体蛋白的磁珠与细胞裂解液或组织提取液中的蛋白混合体系进行孵化,混合体系中的目标蛋白与磁珠上的抗体蛋白发生特异性结合,再通过离心或洗脱去掉没有与抗体蛋白结合的杂蛋白,将目标蛋白分离出来,zuì后结合其他技术(如质谱)可以鉴定目标蛋白的种
多肽组学
多肽组学-详情多肽是生物体内天然存在的、由氨基酸组成的、具有生物活性的小分子化合物,如激素、神经递质、抗菌肽、细胞生长因子等。多肽与蛋白质之间没有明显的界限,一般将分子质量小于30kDa的蛋白质称为多肽。多肽组学就是以生物体内的全部多肽为研究对象,对多肽的结构、功能、变化规律以及它们之间的相互关系等进行全面系统的分析,旨在研究不同生理或病理条件下多肽的合成、加工和降解过程,以及其调节基因表达和物质代谢等
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