蛋白全谱分析

蛋白全谱分析-详情蛋白全谱分析是一种自下而上的蛋白质组研究技术，又称质谱Shotgun（鸟枪法）分析。蛋白全谱分析致力于尽可能多的鉴定复杂混合体系中的蛋白质，如体液、血液、组织液、细胞裂解液等。其基于高效液相色谱和质谱技术，在zuì小限度分离蛋白质的同时可对上千种蛋白质或肽段进行定性和定量鉴定，是高通量蛋白鉴定分析的有力工具。蛋白全谱鉴定shǒu先需要将蛋白质样品消化酶解为肽段，再利用高效液相色谱分离大小不同

蛋白磷酸化分析

蛋白磷酸化分析-详情蛋白质的磷酸化是一种可逆的翻译后蛋白质修饰，是指蛋白激酶将ATP或GTP的γ位磷酸基团转移到底物蛋白特定氨基酸侧链的过程。蛋白磷酸化调控着生物体内诸多转导途径和细胞代谢过程，包括一些疾病的发生、存续等，蛋白磷酸化分析对于阐明生命本质和疾病的发生机制有显著意义。蛋白磷酸化分析主要研究的内容包括蛋白是否发生磷酸化、发生磷酸化的氨基酸位点以及发生磷酸化的肽段含量。目前，进行蛋白磷酸化分析的

蛋白结构表征

蛋白结构表征-详情蛋白质是由一条或多条肽链结合而成，各肽链的连接或折叠方式构成了其特殊的立体空间结构或称三维构象。每种天然蛋白质都有其独特的空间结构，独特的空间结构决定了蛋白质行使特定的生物学功能，因此要想研究蛋白质的生物学功能，就必须进行结构表征。蛋白质分子具有四种不同的空间结构：一级、二级、三级和四级结构。蛋白质一级结构又称初级结构，指蛋白质多肽链氨基酸的排列顺序和二硫键的位置。蛋白质的二级、

蛋白相互作用

蛋白相互作用-详情蛋白相互作用是指两个或两个以上的蛋白质形成蛋白质复合体或多蛋白网络的现象。单一的蛋白质难以发挥复杂的生物学功能，通常需要多个蛋白相互结合实现复杂的细胞学功能。生物体内的蛋白质-蛋白质相互作用主要以3种形式存在：形成多亚基蛋白质四级结构（血红蛋白4个亚基的装配）、蛋白复合体（病毒外壳）以及瞬时蛋白质-蛋白质相互作用。研究蛋白相互作用的方法有很多，可以分为体外和体内两类。体外的方法主要有

蛋白分子量GPC测试

蛋白分子量GPC测试-详情GPC即凝胶渗透色谱，蛋白分子量GPC测试就是利用凝胶渗透色谱仪对蛋白的分子量进行检测。下面小编将对凝胶渗透色谱检测蛋白分子量的基本原理进行简单的介绍。凝胶渗透色谱仪主要由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和计算机处理系统组成。色谱柱填充有不同尺寸的多孔性凝胶或多孔微球，当蛋白样品通过该色谱柱时，相对分子量或体积较大的蛋白不能进入多孔凝胶，而从多孔凝胶的间隙中流过，zuì先流出色谱柱；而

蛋白泛素化怎么检测

蛋白泛素化怎么检测-详情泛素化修饰是蛋白翻译后的一种修饰方式，指小分子多肽泛素(Ubiquitin, Ub)在相关酶的作用下通过共价键连接在底物蛋白或目标蛋白上的过程。泛素化修饰主要介导蛋白质发生降解，但随着蛋白泛素化修饰的深入研究，人们发现泛素化修饰还可以参与调节其他的生命活动，例如细胞周期、转录激活、基因沉默以及免疫应答等。那么如何检测靶蛋白是否发生了泛素化修饰呢？蛋白质泛素化修饰检测的内容包括样品蛋白质是否

蛋白翻译后修饰

蛋白翻译后修饰-详情很多蛋白质在加工合成过程中都要经历一个共价修饰的过程，即在相应酶作用条件下，通过在氨基酸残基处加上官能基团而改变蛋白质的性质，这种过程称为蛋白质翻译后修饰（PTMs, post-translation modifications）。目前，已发现超过400多种不同的翻译后修饰，主要形式包括糖基化、磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化等。蛋白质翻译后修饰具有重要的生理意义，参与调节多项生命活动，如蛋白质的物理化学性质、活性状态

蛋白定量与磷酸化组

蛋白定量与磷酸化组-详情蛋白定量与磷酸化组就是将磷酸化蛋白质进行定量分析，即磷酸化定量蛋白组分析，用于检测某一磷酸化蛋白的含量水平。磷酸化定量蛋白组分析的大致流程如下：shǒu先将含磷酸化修饰的蛋白样品进行酶切；然后利用TiO2、抗体或IMAC技术富集磷酸化肽段；将富集得到的磷酸化肽段进行串联质谱分析；zuì后利用质谱数据结合生物信息学分析对磷酸化蛋白质的含量进行鉴定。在进行磷酸化蛋白定量分析时，由于很多样品是

蛋白的磷酸化和糖基化位点预测

蛋白的磷酸化和糖基化位点预测-详情蛋白质磷酸化和糖基化是常见的蛋白质翻译后修饰，能在一定程度上影响蛋白质的结构和生物学功能，使被修饰的蛋白质发挥特殊的调控功能。蛋白磷酸化是在特异性蛋白激酶催化作用下，蛋白氨基酸残基共价结合三磷酸腺苷（ATP）或三磷酸鸟苷（GTP）的过程。该修饰是可逆的，在蛋白磷酸酶的作用下，蛋白质可以发生去磷酸化。蛋白磷酸化位点分析即鉴定蛋白质磷酸化发生在肽链的几号位氨基酸上以及发生在

蛋白纯度测定

蛋白纯度测定-详情蛋白质纯度是蛋白分析中非常重要的一项理化性质参数，对于后续的实验分析具有举足轻重的作用，如果利用含有杂质的蛋白质进行后续的检测分析，会产生较大的误差，造成分析数据不准确。因此，在进行蛋白分析前有必要对蛋白质的纯度进行评价，排除可能影响后续实验的因素。一些蛋白类产品，特别是蛋白类药物，如疫苗、重组蛋白、抗体蛋白等，尤其要进行纯度检测，以保证其安全性和治疗效果。目前，检测蛋白质纯度的

蛋白半定量，定量，绝对定量

蛋白半定量，定量，绝对定量-详情在蛋白质分析中主要对定性分析和定量分析进行研究，定量分析就是对蛋白样品的含量进行鉴定，可以分为定量、半定量、相对定量和jué对定量。蛋白定量很容易理解，那什么又是半定量、相对定量和jué对定量呢？今天小编就和大家聊聊这个问题。蛋白定量就是对某蛋白样品进行精确的定量鉴定，其测定结果较接近真实值，可信度高。通常利用标记（iTRAQ、TMT、SILAC等）或非标记（Label Free）策略进行蛋白

蛋白de novo测序

蛋白de novo测序-详情蛋白质序列即蛋白质的一级结构，是指组成蛋白质的氨基酸的排列顺序，在很大程度上决定了蛋白质或多肽的高级结构和生物学功能。因此，蛋白质序列测定有助于研究功能蛋白或活性多肽作用的机理，也为人工合成活性多肽提供了依据。蛋白de novo测序即蛋白从头测序，蛋白从头测序利用串联质谱技术对目标蛋白质进行全序列分析，不依赖已有的序列数据库，非常适合一些新发现的蛋白质或者数据库中无法匹配到的蛋白质的

单细胞蛋白质组

单细胞蛋白质组-详情单细胞蛋白质组，顾名思义，就是研究单个细胞表达的所有蛋白质。不同细胞之间的蛋白表达是有差异的，特别是正常生理细胞与病理细胞之间，比较不同单细胞之间蛋白的种类和含量以及修饰方式对于阐明细胞间的功能差异至关重要，也是理解病理机制的关键。单细胞蛋白质组学有助于我们从细胞和分子层面探究疾病发生以及持续存在的原因，在医学研究领域发挥着越来越重要的作用。研究单细胞蛋白质组学的方法主要有基于

GST pull-down

GST pull-down-详情Pull down（拉下实验）是一种体外亲和纯化蛋白的技术，Pull down技术将已知蛋白（诱饵蛋白）利用亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）进行标记，再特异性识别混合体系中的配体蛋白（靶蛋白），以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是在体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。GST pull-down实验，也称GST融合蛋白沉降技术，是利用谷胱甘肽S-转移酶（GST）标记诱饵蛋白进行的Pull d

单克隆抗体测序

单克隆抗体测序-详情单克隆抗体是单一种B细胞增殖分化的子代细胞（浆细胞）产生的只针对单一抗原决定簇的免疫球蛋白分子，其本质是一种抗体蛋白。与多克隆抗体不同，一种单克隆抗体只特异性结合一种抗原决定簇。单克隆抗体为新药研发、诊断试剂开发提供了重要思路，现已广泛用于畜禽传染病的诊断以及肿瘤的治疗等方面。单克隆抗体测序指测定单克隆抗体的一级结构—氨基酸种类和排列顺序，即单克隆抗氨基酸序列分析。单克隆抗体的一

大肠杆菌宿主残留蛋白检测

大肠杆菌宿主残留蛋白检测-详情宿主残留蛋白（host cell protein, HCP）也称宿主细胞蛋白、宿主蛋白残留，是指宿主细胞表达的除蛋白类药物以外的其他蛋白质。而大肠杆菌宿主残留蛋白就是指宿主细胞大肠杆菌所表达的除我们需要的蛋白药物以外的一系列蛋白，这些大肠杆菌蛋白如果掺杂在蛋白药物中进入人体，可能会影响药物的疗效，甚至会造成一些潜在的风险，因此必须对其含量进行严格的控制和检测，保证其安全性和治疗效果。大肠杆

测圆二色谱

测圆二色谱-详情圆二色谱也称圆二色光谱，是一种根据物质的圆二色性（circular dichroism，CD）发展而来的蛋白质空间结构研究技术。圆二色性是指当平面偏振光经过光活性物质时，由于光活性物质对左、右圆偏振光的吸收不同，导致左、右圆偏振光变成椭圆偏振光的现象。大多数具有活性的生物大分子由于其不对称的空间结构都具有光学活性，均可作为圆二色谱研究的对象。蛋白质是一种典型的光学活性物质，其不对称的二级构象，如α-螺旋

测序需要提供什么

测序需要提供什么-详情测序包括基因组测序、蛋白质测序、代谢组测序、转录组测序以及扩增子测序等，因此在测序之前，shǒu先要明确自己的测序对象，再选择相应的方法或者公司进行序列分析。那么进行序列测定需要准备或者提供什么呢？今天我们就来聊一聊关于蛋白测序的相关问题。蛋白测序的主要方法有质谱法和基于Edman 降解的N端测序法，其中质谱法是zuì常用的测序的方法，可以进行末端测序（N/C端）、全长序列分析以及从头测序等

蛋白质磷酸化修饰类别、富集和鉴定方法

蛋白质磷酸化修饰类别、富集和鉴定方法-详情导读• 蛋白质磷酸化修饰定义？• 蛋白质磷酸化修饰类别？• 蛋白质磷酸化鉴定方法有哪些？• 蛋白质磷酸化肽段富集方法？在哺乳动物细胞生命周期中，大约有1/3的蛋白质发生过磷酸化修饰，在脊椎动物基因中，约有5%的基因编码的蛋白质是参与磷酸化和去磷酸化过程的蛋白激酶和磷酸酶。它可以通过激发、调节诸多信号通路进而参与调控生物体的生长、发育、逆境应激、疾病发生等多种生命过程

蛋白磷酸化鉴定技术介绍

蛋白磷酸化鉴定技术介绍-详情蛋白质表达以后，在发挥真正功能之前，会经过多种不同的翻译后修饰，例如，磷酸化，乙酰化，糖基化等基团修饰。本文主要讲下两种研究蛋白磷酸化修饰的方法：Western Blot和质谱检测法。蛋白质翻译后修饰种类蛋白磷酸化修饰过程蛋白磷酸化修饰这一过程是通过蛋白激酶催化，将磷酸基团从ATP转移到多肽底物的丝氨酸、苏氨酸，或酪氨酸残基上。并且磷酸化修饰的过程是可逆的，去磷酸化反应由蛋白磷酸酶催化