人结直肠癌细胞LS513质粒载体网

　　产品信息

名称LS513(人结直肠癌细胞)(STR鉴定正确)

别称LS-513;LS 513

种属人

年龄（性别）男；63岁

组织来源盲肠

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述LS513 is a colorectal carcinoma cell line isolated in 1985 from a primary tumor biopsy from a 63 year old Caucasian male patient diagnosed with a Dukes'C mucin secreting cecal tumor located at the Bauhin valve.

生物安全等级1

生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

推荐传代比例1:3-1:5

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间20 hours(PubMed=25984343)

冻存条件冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

致瘤性Yes,forms tumors in nude mice

抗原表达情况carcinoembryonic antigen(CEA);ICAM-1;HLA class I positive

基因表达情况transforming growth factor beta 1

保藏机构ATCC;CRL-2134

细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

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