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一、产品信息:
1.平台编号:zl-077275
2.细胞名称:SLR 25人肾细胞癌细胞
3.物种:人
4.组织:肾
5.细胞形态:上皮细胞样,贴壁生长
二、培养方式:
1.培养基:SLR 25专用培养基【RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%】2.培养环境:37℃、5%CO2
3.传代培养:当细胞密度达到80%以上时,可以进行传代,传代比例1:2~1:4,1~2天传代一次。
(1)用巴氏滴管吸出细胞培养瓶内的培养基;
(2)加入1ml的PBS,轻轻晃动润洗细胞,然后将PBS吸出;
(3)加入1ml的胰酶,轻轻晃动浸润细胞,然后放在培养箱内消化1~3分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间);
(4)在显微镜下观察,发现细胞变圆,轻轻晃动细胞便开始脱落,这时可以终止消化;(5)加入4ml含血清的完全培养基,用移液器吹打细胞,使细胞脱落并形成单细胞悬液;(6)将细胞悬液转移到15ml的离心管,1000rpm离心5min;
(7)离心完成后吸出上清丢弃,再用移液管取10ml完全培养基将细胞重悬,轻轻吹打混匀;
(8)将细胞悬液分装到两个新的T25细胞培养瓶中,放在37℃的CO2培养箱中进行培养。4.细胞冻存:使用本公司无血清冻存液可直接将细胞冻存在-80℃(无需使用程序降温盒),细胞在-80℃可保存3年,长期保存建议使用液氮罐。
5.冷冻复苏细胞:将含有1mL细胞冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
三、质量检测:
1.细菌检测:阴性
2.支原体检测:阴性
四、售后服务:
1.收到细胞后请及时查看瓶身有无破损,是否漏液等现象;
2.用75%的酒精喷洒培养瓶之后,放在培养箱中静置2-4小时以稳定细胞状态,然后用显微镜观察细胞状态并拍照记录,40倍和100倍照片各一张(细胞在运输过程中存在少量的漂浮或者死亡属于正常现象);
3.原瓶中的培养基在细胞传代之后不建议继续使用,请配制新的完全培养基或者购买本公司的专用培养基;
4.建议定期对细胞进行拍照记录;收到细胞后7天内,对细胞生长状态有任何问题,可申请售后。
5.强烈建议:在第一次细胞传代时,使用购买本公司配置的细胞培养瓶将细胞按照1:2进行传代,可以对比测试自配的培养基是否可以养好细胞。
如果有以上任何问题,请及时联系本公司。
五、注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
1.本产品仅限于科研用途,若用于临床诊断、治疗等其它用途,本公司概不负责!2.若使用本产品发表科学论文,请标注:SLR 25由智立中特(武汉)生物科技有限公司(zlzt)提供。