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蛋白里面检测磷酸化是什么意思?蛋白里面检测磷酸化即针对磷酸化蛋白质进行全面的分析,包括对磷酸化的鉴定、定位和定量。可解析关键蛋白的磷酸化水平变化规律,从分子水平揭示机体重要性状和代谢途径的调节机制。
蛋白磷酸化由蛋白激酶(protein kinase)催化完成。蛋白激酶将供体ATP(少数情况下)上的γ位磷酸基团以酯键的形式连接到底物蛋白的特定氨基酸链的羟基上。真核生物蛋白被磷酸化的氨基酸主要包括丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸。原核生物还可能发生在天冬氨酸、谷氨酸和组氨酸上。细胞中蛋白磷酸化水平是动态变化的,细微变化均可导致细胞代谢及生理状态的变化。
蛋白质磷酸化修饰的检测对于揭示磷酸化修饰在机体生命活动中的调控机制至关重要。通常使用质谱法进行蛋白质磷酸化的检测,质谱检测拥有高灵敏度、高通量的特点,更重要的是具有位点分辨率,因此基于质谱的磷酸化蛋白质检测方法得到不断的发展和推广。常见的磷酸化蛋白质质谱检测流程:首先对磷酸化肽段进行富集,然后进行液相色谱串联质谱分析,最后通过搜索引擎对修饰位点进行鉴定和定量。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出磷酸化定量蛋白组分析服务技术包裹。只需要将您的实验目的告诉我们并寄送样品,百泰派克生物科技负责项目后续,包括蛋白提取、蛋白酶切、磷酸化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析所有事宜。
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