质粒咋体网网C2C12小鼠成肌细胞

C2C12小鼠成肌细胞

平台编号:zl-056407

规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞介绍

这是D.Yaffe和O.Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆(由H.Blau等人构建)。C2C12细胞株分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)处理，导致分化途径从成肌细胞转换成成骨细胞。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。

细胞特性

1）来源：组织：肌肉品系：C3H细胞类型：成肌细胞

2）形态：成肌细胞贴壁生长

3）含量：>1x106细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。

一．培养基及培养冻存条件准备

1）准备DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。C2C12细胞生长较快，培养时细胞密度不可过高，否则容易分化

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例；

1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

人食管癌细胞zl-056785 TE-10 1×10⁶cells/T25培养瓶

*人血管平滑肌细胞zl-056784 T/G HA－VSMC 1×10⁶cells/T25培养瓶

人肾上腺皮质癌细胞（DMEM）zl-056783 SW-13+DMEM 1×10⁶cells/T25培养瓶

人滑膜肉瘤细胞zl-056782 SW 982 1×10⁶cells/T25培养瓶

人膀胱移行细胞癌zl-056781 SW 780 1×10⁶cells/T25培养瓶

人胰腺癌细胞zl-056780 SW1990/SW-1990 1×10⁶cells/T25培养瓶

人软骨肉瘤细胞zl-056779 SW 1353 1×10⁶cells/T25培养瓶

小鼠骨髓瘤细胞zl-056778 Sp2/0-Ag14 1×10⁶cells/T25培养瓶

人胃癌细胞zl-056777 SNU-5 1×10⁶cells/T25培养瓶

人神经母细胞瘤细胞zl-056776 SK-N-MC 1×10⁶cells/T25培养瓶

人肾母细胞瘤细胞zl-056775 SK-NEP-1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人神经母细胞瘤细胞zl-056774 SK-N-BE(2)1×10⁶cells/T25培养瓶

人皮肤黑色素瘤细胞zl-056773 SK-MEL-1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人结直肠腺癌细胞zl-056772 SK-CO-1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人脑瘤细胞zl-056771 SF767 1×10⁶cells/T25培养瓶

人脑瘤细胞zl-056770 SF763 1×10⁶cells/T25培养瓶

人脑瘤细胞zl-056769 SF17 1×10⁶cells/T25培养瓶

人脑瘤细胞zl-056768 SF126 1×10⁶cells/T25培养瓶

小鼠胚胎细胞*zl-056767 SC-1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人前列腺正常细胞zl-056766 RWPE-2 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠气管上皮细胞zl-056765 RTE 1×10⁶cells/T25培养瓶

人膀胱移行细胞乳头瘤细胞zl-056764 RT4 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠皮肤成纤维样细胞zl-056763 RS1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人淋巴瘤细胞zl-056762 Romas 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠肌肉成纤维样细胞zl-056761 RM1 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠肺成纤维样细胞zl-056760 RL1 1×10⁶cells/T25培养瓶

人结肠癌转基因细胞zl-056759 RKO-E6 1×10⁶cells/T25培养瓶

人结肠癌转基因细胞zl-056758 RKO-AS45-1 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠肾细胞zl-056757 RK1 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠胰岛β细胞瘤细胞zl-056756 RIN-m5f 1×10⁶cells/T25培养瓶

大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞zl-056755 RBL-1 1×10⁶cells/T25培养瓶