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与N-聚糖不同,O-聚糖是一种较小的高度多样化的支链碳水化合物分子,可附着在不同蛋白结构上。这一特性导致了分析的复杂性,对O-糖基化位点进行分析也十分困难。糖基化位点的可变性是细胞活性的关键指标,血清蛋白糖基化位点附着的减少与先天性糖基化疾病(CDGs)的严重程度之间的相关性证明了这一点。因此,为了充分了解蛋白糖基化对人体健康的影响,准确确定位点占用率具有重要意义。
O-糖基化位点分析的一般步骤包括糖蛋白的蛋白水解消化、亲水性相互作用液相色谱法对糖肽的富集和分离。可使用反相液相色谱-离子阱质谱联用质谱分析富集的O-糖肽。
O-糖基化位点附着一般分析流程
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1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 鉴定的糖基化位点的详细信息
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