本品是Seebio®sTaq DNA polymerase的升级版,提供了高温条件下的5’→3’外切酶活性,可方便用于Taqman探针法qPCR。本品具备Hot-Start特性,聚合酶活性在室温条件下受到抑制,从而抑制了因引物非特异性退火和引物二聚体形成而造成的非特异性扩增,提高PCR反应的特异性
贮存溶液:20 mM Tris-HCl(pH8.8),100 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.5% Tween 20,0.5% NP-40,50%,Glycerol
保存: -20℃
特点
-
Hot start
-
5’→3’ DNA聚合酶活性
-
缺失3’→5’外切核酸酶活性
应用
通过PCR方法进行DNA扩增
仅限研究与生产用途
PCR 产物
本品扩增获得PCR产物的3’-末端有突出的A,允许通过TA克隆策略连接入T-载体。该产物也可以在末端修平和磷酸化后连接入平末端载体。
推荐 PCR 条件
10× PCR buffer
|
5μl
|
dNTP(2.5 mM)
|
8μl
|
模板DNA
|
< 500 ng
|
引物1
|
0.2 - 1.0 μM (终浓度)
|
引物2
|
0.2 - 1.0 μM (终浓度)
|
Enhan sTaq
|
1μl
|
补充无菌纯净水至
|
50 μl
|
推荐 PCR 程序
注意:最佳PCR条件会随着不同引物的热力学性质的差异而发生变化。