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脑死亡大鼠模型建立
5%异氟醚与0.4-0.6 L/min纯氧混合吸入诱导麻醉。麻醉成功后,20G套管针经口腔气管内插管,连接小动物呼吸机进行机械通气(潮气量16ml,呼吸频率70次/min,吸呼比值1:2.5),1.5~2.O%异氟醚维持麻醉。仰卧位将大鼠固定于电热毯上,维持直肠温度36.5~37.0℃。颈前正中纵行切口1.0—1.5cm,游离气管,4-0尼龙线固定套管针;手术显微镜下游离右侧颈总动脉和颈外静脉,行动脉、静脉置管术,分别插入PE-10导管并用8-0高分子线固定。动脉导管连接TSD-104A压力传感器,通过多通道生物信息采集与分析系统全程监测平均动脉压和心率。俯卧位固定小鼠,头顶正中线纵行开口1.5cm,分离皮下组织、肌肉和骨膜,用电动钻在右侧额骨、顶骨各开一个孔(直径约0.5mm),将脑电图模块(electroencephalogram,EEG)正、负线经此二孔插入硬膜外并用牙托粉固定,EEG地线插入颈背部皮下;矢状缝左侧外4 mm顶骨区域斜向后45°钻直径为1 mm的孔,将连接微量注射泵(KD scientific公司,美国)的2F Fogarty球囊导管(爱德华生命科技有限公司,美国)经该孔插入颅内并缝合头皮。
诱导:经导管气囊缓慢注入生理盐水(40µl/min),升高颅内压,直至脑干疝。保持气囊膨胀,密切监测血压。出现低血压则缓慢减少气囊容量00弘L触in),同时可补充乳酸林格氏液,至血压恢复正常,维持平均动脉压(MAP)80 mmHg以上。通过呼吸停止实验阳性、角膜反射消失以及瞳孔固定散大等明确脑死亡诊断~