吖啶酯(NSP-SA-NHS)蛋白标记的发光染料配置说明

吖啶酯（NSP-SA-NHS）Cas199293-83-9及其相关化合物已被证明是非常有优势的化学发光标记物，其稳定性、活性和敏感性超过了某些放射性同位素。吖啶酯能与含有一级氨基的蛋白发生反应。在碱性条件下，NHS作为离去基团被取代，蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。反应完成后，多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。

在存在碱性过氧化氢时，吖啶标记的蛋白不需要酶催化可自行发光。具体发光原理是在碱性过氧化氢溶液中，吖啶酯受到过氧化氢离子的进攻，生成一个有张力的不稳定的二氧乙烷，进一步分解成CO2和电子激发态的吖啶酮，当吖啶酮回到基态时发出最大吸收波长430nm的光子。

这个发光过程是十分短暂（整个过程的发生小于2秒），触发方案必须增加内部光度计和光子探测器；另外，也可以使用配备自动进样器的多功能酶标仪进行发光数据采集。蛋白质，多肽，抗体，核酸都可以用本产品进行标记。吖啶酯在碱性过氧化氢的激发下快速发光，因此通过收集光子可以检测到标记化合物。

主要用于：化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。

储存条件： ﹣20℃，避光

运输条件：  2-8℃，避光

1.配制说明

标记缓冲液：0.2M NaHCO3  (pH=9.0)；

标记终止缓冲液： 10% 赖氨酸  0.2M NaHCO3  (pH=9.0)溶液；

脱盐纯化缓冲液：0.1M Na2HPO4-NaH2PO4  (pH=6.5)；

吖啶酯发光液：(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。

2. 计算标记所用抗体（蛋白质）和吖啶酯的量：

通常设定摩尔比n(抗体): n(吖啶酯)=1:10~1:50，具体需根据氨基酸组分进行摸索调整；

配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液，注意玻璃器皿盛放并避光；

使用0.2M NaHCO3（pH=9.0） 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗体反应液 。

需要注意的是，吖啶酯标记的蛋白可以在酸性缓冲液中4℃避光存储（注意补加叠氮钠等防腐剂），如果储存效果不佳，则请避光保存于-20℃或者-80℃。德晟专业生产化学发光试剂、化学发光底物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。我们还可以接受定制合成服务，欢迎前来咨询订购！