1-4-哌嗪二乙磺酸PIPES作为缓冲剂你了解吗

PIPES，中文名为1-4-哌嗪二乙磺酸，是一种两性缓冲液,pH缓冲范围是6.1-7.5，不溶于水，溶于NaOH水溶液。其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。是1960由Good’s等研发的乙磺酸系列缓冲试剂之一，具有Good’s缓冲液共有的一些重要特征，包括：1）低紫外（λ≥260 nm）吸光度；2）水溶性最强，而其他溶剂中溶解性最低；3）pKa位于中性范围，且不易受温度影响；4）pH值稳定；5）干扰反应小，酶或者化学稳定；6）易合成。PIPES的有效缓冲范围为pH 6.1-7.5，pKa=6.8（25℃）。由于其pKa接近生理性pH，适用于细胞培养。另外，动植物组化学中，PIPES还可作为缓冲试剂以最小化戊二醛固定导致的脂质损伤和实验假象。
PIPES不同于含二（2-羟乙基）氨基基团的缓冲剂（如Bis-tris，Bicine），与多数金属离子不能形成稳定配合物，适用于含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。根据已有的研究结果，PIPES可被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白，用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1和ARF2，作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。另外，由于PIPES能形成自由基，因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法，应当使用低浓度的PIPES缓冲液，这是因为PIPES具有相对较大的离子强度，而且其pKa值具有浓度依赖性。
 PIPES pKa 值接近生理 pH, 在通过细胞膜的时候不能被吸收，而且可透过紫外线。可应用于体外细胞培养基;在乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸的研究中发现在37℃ PIPES能稳定172小时，优于Tris稳定72小时;用PIPES缓冲液配制的PI染液染色新鲜细胞，可以对临床肿瘤的细胞增殖状况和DNA 倍性进行分析;在免疫荧光标记时可用50 mmol/L PIPES 缓冲液配制的4%多聚甲醛进行固定。PIPES 能够满足当腺苷二磷酸(ADP)结合于松弛的扇形成肌纤维细胞时，需要极低的络合二价阳离子的条件;可以作为缓冲液应用于鼠肝脏过氧化物酶体中尿酸氧化酶超微结构的定位;还可以诱导纯化的微管蛋白的聚合作用。
PIPES广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面,严禁用于人体。德晟研发生产的本品可用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。但是我们在使用的时候需注意一下几点：
1·在配制实验所用溶液时要用纯水配制，容器使用前需用纯水清洗3次以上。
2·PIPES缓冲液对于对光线敏感,容易分解需装在棕色容器中。
3·各溶液标明名称,规格,浓度和配制日期。
4·禁止皮肤直接接触溶液以免有毒物质照成身体伤害。
5·避免温度剧烈变化，造成溶液变质，做到随用随取，以免造成分析结果误差。
    因每种细胞对溶液的敏感度不同，在筛选细胞之前，必须确定需要筛选溶液的浓度范围（浓度太高会杀伤所有的细胞，浓度太低则没有毒性这两种情况下均起不到筛选作用）。
德晟自2005年成立以来，专业从事采血管添加剂，体外诊断试剂，缓冲剂，发光底物的研发、生产、销售。在生物缓冲剂方面有专业的生产研发力。为国内外百余家生产企业提供产品及原料解决方案。