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荧光原位杂交自产生之日起,由于具有其他技术所不具有的优越性,因此发展迅速,应用广泛。Transgene Mapping (FISH) 技术是一种应用荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或是染色体上显示DNA序列位置的方法, 该技术可以用来分析重组细胞系(如重组CHO等)中外源基因在染色体上的整合情况。Transgene Mapping (FISH) 技术也是鉴定工业化重组细胞系稳定性的有效手段。北京安必奇生物科技有限公司在Transgene Mapping(FISH)方面积累了丰富的经验,成功帮助多家公司以及科研机构检测他们重组细胞系。
Transgene Mapping-转基因的细胞学鉴定
在外源基因表达中一个重要的影响因素就是位置效应,即外源基因在受体细胞基因组中的位置不但影响转入基因的表达也影响生物内在基因的结构和表达。如果原位杂交检测显示特异的杂交信号,则表明外源基因已经整合到该生物的染色体上。除此之外,重组细胞系的分析和鉴定也非常重要, 与基因拷贝数相反,似乎更考虑了外源基因的染色体整合。 由于整合事件的随机性质,几个位点可能能够支持转基因的转录,或者表达水平受基因环境在基因座处的作用 (位置效应) 影响很大。 荧光原位杂交(FISH)是一项功能强大的技术,可用于可视化外源基因整合位点并提供对外源基因的情况有更好理解。凭借多年的经验和深入的知识,我们可以使用荧光原位杂交(FISH)来确认转基因的整合并确定其染色体带位置。
图1. 检测大鼠转入基因的染色体定位。如图所示,外源基因位于大鼠染7号染色体的q21区域。
服务优势
需要提供cDNA(长度至少2kb)/基因组DNA片段/基因ID等信息
物种:人类,小鼠,大鼠,仓鼠(CHO细胞系),鸡等
确认外源基因的整合情况
可视化染色体带的位置
可以根据客户的要求提供定制化服务
服务流程
探针设计及合成
中期染色体的制备
原位杂交试验
拍照
结果分析及项目报告