总黄酮含量测试试剂盒酶标板法

总黄酮含量测试试剂盒(C002-96T 酶标板法)

一.测定原理

黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯和物，加入碱溶液后显红橙色，在510nm处有最大吸收峰。芦丁是公认的黄酮类化合物，常被用作标准品。

二.试剂组成

试剂一：无色液体2.5mL ×1瓶

试剂二：无色液体2.5mL ×1瓶

试剂三：显色液10mL ×1瓶

试剂四：1.0mg/mL芦丁标准溶液200μL×1瓶

三.储存条件及有效期

试剂一、试剂二、试剂三4℃保存，试剂四-20℃保存，可保存3个月。

四.试剂的配制

试剂四应用液：

移取50μL试剂四，加入450 μL双蒸水，充分混匀，得到500 μL 浓度为100 μg/mL的芦丁标准液，分别采用移取0，20，40，60，80，100 μL于酶标板中，加入100，80，60，40，20，0μL双蒸水，得到0，20，40，60，80，100 μg/mL芦丁标准液（试剂四应用液）。

五.操作步骤

充分混匀，室温静置6min。