总黄酮含量测试试剂盒分光光度计法

总黄酮含量测试试剂盒(C002-96T 分光光度计法)

一.测定原理

黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯和物，加入碱溶液后显红橙色，在510nm处有最大吸收峰。芦丁是公认的黄酮类化合物，常被用作标准品。

二.试剂组成

试剂一：无色液体50mL ×1瓶

试剂二：无色液体50mL ×1瓶

试剂三：显色液200mL ×1瓶

试剂四：1.0mg/mL芦丁标准溶液5mL×1瓶

三.储存条件及有效期

试剂一、试剂二4℃保存，试剂三-20℃保存，可保存3个月。

四.试剂的配制

试剂四应用液：

取2mL试剂四，加入18mL双蒸水，稀释至20mL，得到100μg/mL的芦丁标准液，分别采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL试剂四于空试管中，加入4.0，3.0，2.0，1.0，0mL双蒸水，得到20，40，60，80，100 μg/mL芦丁标准液。

五.操作步骤

充分混匀，室温静置6min。

充分混匀，室温静置6min。

 充分混匀，室温静置15min，以试剂空白调零，分光光度计510nm处测吸光值。