Caco-2细胞渗透性实验

公司介绍
        武汉合研生物医药科技有限公司坐落于光谷生物城，是一家专注于提供新药发现阶段的技术服务，以中小微新药研发企业为服务主体的创新型公司。合研生物拥有一支训练有素的药物研发技术团队，提供的服务覆盖虚拟筛选、酶学靶点筛选、抗肿瘤药物活性评价、细胞功能学检测、药理病理学服务等各项技术，同时也提供可购买的商业化合物库。我们的技术团队在分子生物学、细胞生物学、结构生物学等领域具有丰富的经验，通过酶水平、细胞水平测定等技术平台帮助客户进行化合物筛选及化合物特性、作用机制等研究。合研生物以高效、高性价比的专业服务帮助客户更快地达到目标，帮助客户推进药物发现的进程。
我们的服务
Caco-2 通透性与转运体试验，须注明单向/双向。周期一般4-6周。
Caco-2细胞模型建立大致步骤：      
     1、细胞的培养及接种铺板
     2、检测电阻
             Caco-2细胞培养21天，检测电阻。
     3、通透性实验
             首先弃去Transwell小室内外培养液，用37℃ Hanks液（PH=7.4）轻柔地清洗细胞表面3次以除去表面的杂质，然后加入37℃ Hanks液，置于37℃孵箱中孵育30分钟。吸去缓冲溶液，在AP侧（内孔）加入Xml含有受试药物的Hanks液，作为供给液，在BL侧（外孔）加入Ym1空白的Hanks液作为接收液。此为吸收方向，A-B。
     4、外排实验
             弃去Transwell小室内外培养液，在BL(外孔）侧加入Yml含有受试药物的Hanks液，作为供给液，在AP侧（内孔）加入Xm1空白的Hanks液作为接收液。此为外排方向，B-A。
     5、采样和检测
             将载有Transwell小室的24孔板于37℃中温孵，设定不同时间点时间从接受池取出Zul的接受液进行液相检测，然后补加相应体积的空白37℃ Hanks液。
     6、双向转运实验
             相同药物同时进行通透性实验和外排实验，考察药物的渗透方向率（PDR)。