上海惠诚生物供应国标用抗体纯化柱ProG

抗体纯化柱ProG产品说明书
1. 产品简介
抗体纯化柱（ProG）以琼脂糖凝胶为基质，以重组Protein G为配基，具有良好的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便。该产品通过偶联的Protein G配基特异性地与抗体的Fc区结合，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和细胞破碎液等样品中得到高纯度的单克隆抗体，尤其是羊IgG、马IgG、鼠IgG2a或人源IgG3等ProA介质结合能力弱的抗体。
2. 产品特性

参数	指标
柱体积	1ml
基质	琼脂糖凝胶
配基	r-Protein G
形状	球形
介质平均粒径	90 μm (45-165)
配基密度	5mg Protein G/ml wet gel
动态载量	30mg-40mg h-IgG
最高流速（25℃）	3ml/min
最高耐压	0.3 MPa (3 bar)
pH稳定性	3~12（长时间）；2~13（短时间）
保存	4~8 oC（20%乙醇）

3. 应用
抗体纯化柱（ProG）广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
层析系统连接柱子时，严防气泡进入，导致载量下降。
平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（20 mM PB+0.15M NaCl，pH 7.0，添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。
进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤（0.45μm）处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱：用洗脱缓冲液（20 mM乙酸钠，pH 3.0-4.0或0.1M甘氨酸，pH 3.0）洗脱，收集流出液。洗脱后，应立刻用碱性缓冲液（如1M Tris/HCl, pH 9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，避免抗体失活，维持抗体的生物活性。
再生、原位清洗：介质使用数次（建议5-10次，具体次数与料液的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行再生、在位清洗。

（1）用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用；

（2）也可用0.05M NaOH+1M NaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV，并用3~10 CV的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。

其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

Shanghai HuicH Biotech Co.，Ltd.

上海惠诚生物2010年至今专注于食品检测方面的标准品,优势品牌系列: 

药物: TRC   LGC   USP  LKT    Focus

植提标准品: Extrasynthese  PhytoLab   Chromadex  CaroteNature

糖类: Elicityl  TDB   Ludger   Megazyme   Glycarbo

脂类: Nu-Chek  Larodan   Avanti   Matreya

其他: TCI   ERM   Wako  Jackson  Cayman  laysan

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