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ELISA检 测的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留 酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他 物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时,固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应底物后,底物被酶 催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关, 故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
ELISA 检测的标本较为广泛，如血清、唾液、尿液、粪便等均可以作为标本检测其中某种抗体或抗原成分。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理 (如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝 剂，而血清标本只要待血液自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血, 红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
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