|
分子筛是一种包含有精确和单一的微小孔洞的材料,可用于吸附气体或液体。分子筛HPPLC,又称为体积排阻色谱(SEC, size exclusion chromatograghy),小分子量的化合物进入凝胶孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入空中,会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分离效果,分离时间也很短,一般在3个小时以内,同时获得的层析分离峰也更小。
蛋白质分子筛SEC纯度分析
SEC进行蛋白纯化的优点:
1, 可进行缓冲液交换和脱盐。
2, 可分离其他纯化技术难以分离的相似品种(如蛋白片段和低聚物)。
3, 可与多种溶剂相容。
4, 不依赖于蛋白质的任何一种特殊形式进行保留和洗脱。
SEC进行蛋白纯化的缺点:
1, 分离效果严重依赖柱子的填装效果。
2, 蛋白质与介质间有非特异性相互作用,会降低分辨率。
3, 对复杂的蛋白质混合物分辨率低。
4, 为保证足够的分辨率,上样量必须较小。这对沉淀得到的高浓度蛋白质是一个问题。
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。反向色谱具有分辨率高和重复性好的特点,使它在蛋白质及多肽分析领域占据核心地位。对于分子结构比较简单的多肽和某些蛋白质,用 RPLC进行纯化制备是一项高效的手段。反相色谱HPLC主要用于分子量<20,000 Da的小分子量蛋白及蛋白质片段分离。
蛋白质反向液相色谱纯度分析
百泰派克生物同时配备了分子筛和反向液相色谱两项蛋白质/多肽纯化分析技术,可用于多种蛋白质/多肽样品分离测定,满足多种蛋白质/多肽样品纯度分析需求。
样品要求:
蛋白或肽的总浓度应不低于0.5μg/μl,体积不少于50μl,如果样品需要脱盐或有样品浓缩的需要,需要对缓存液的成分进行说明。
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的色谱参数(中英文)
3. 原始数据
4. 蛋白质纯度分析结果
基于分子筛和反向色谱的蛋白质纯度分析一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
How to order?