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氢氘交换质谱(hydrogen
deuterium exchange mass spectrometry, HDX MS)是一项研究蛋白质空间构象的质谱技术。这项技术的主要原理是将蛋白质置于重水溶液中,蛋白质表面的氢原子与重水里的氘原子发生互换,发生互换后的蛋白质经过酶切产生多肽片段,质谱鉴定肽段的质量:位于蛋白表面的多肽相比位于蛋白内部的多肽更容易发生氢氚原子交换因而质量增加,由此来推测蛋白质表位构象。此外,氢氘交换质谱还可用于研究蛋白结构动态变化、蛋白间相互作用位点、以及鉴别蛋白表面活性位点等应用。
氢氘交换质谱能够快速研究溶液中天然蛋白中位于蛋白表面的氨基酸序列,所以在研究蛋白动态表位活性位点上有着广泛的应用。由于氢氘交换质谱借助氢氘原子交换的原理,氢氘原子回交会对实验结果的精准性造成很大的影响,因此避免氢氘原子回交至关重要。目前控制氢氘原子回交主要通过缩短液质分析时间以及把温度和pH始终控制在最低回交反应系数的范围内。
百泰派克采用waters先进的nanoACQUITY
UPLC HD-Exchange System分析系统,采用亚二纳米色谱颗粒填料,较普通的大颗粒填料,能够在不损失色谱分离效果的要求下,极大缩短液相分析时间的要求,具有超高的分离度。另外,百泰派克采用在线式自动化前处理与高分辨质谱仪联机使用,不但保证了实验数据的可靠性,而且提高了实验效率,充分保证前处理效果及鉴定结果可靠性。您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括样品处理、酶切、质谱检测、原始数据分析等。
氢氘交换质谱HDX MS分析流程
氢氘交换质谱技术特点
• 对样品需求量小、纯度要求相对较低
• 直接研究溶液中蛋白天然空间构象,无需获取蛋白晶体
• 研究动态变化中的蛋白活性位点和空间表位
百泰派克平台优势
• UPLC-HDX-MS系统温度精准控制在0±1℃,将氢氘原子回交反应控制在最低限度
• 自动化前处理与进样分析,精准控制氢氘原子交换反应时间
• 利用nanoACQUITY UPLC系统获得具有高重现性谱图
• 结合MassLynx®、DynamX HDX数据分析、IDENTITYE和ProteinLynx Global SERVER™,可进行广泛、及时、交互式的结果管理
氢氘交换质谱技术应用领域
• 蛋白质空间构象及活性位点研究
• 蛋白质空间表位动态变化
• 蛋白质与药物之间的结合动态研究
• 蛋白质间相互作用位点研究
• 蛋白质突变或其他处理对蛋白质构象和动力学的影响
样品要求
• 蛋白-配体和蛋白样品
• 样品浓度>1ug/ul
• 样品量>10ug
• 注意:样品最好没有去垢剂。
中/英文项目报告
在最终的技术报告中,百泰会为您提供详细的中/英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 鉴定物质的信息
4. 原始数据
5. 蛋白质空间表位,构象等分析结果
氢氘交换质谱HDX MS分析一站式服务
您只需下单-寄送样品,百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
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