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鸡嗜铬蛋白B(CgB) ELISA 试剂盒
试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无
样本稀释液 6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无
说明书 1份 1份 无
自封袋 1个 1个 无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120 pg/mL
鸡嗜铬蛋白B(CgB) ELISA 试剂盒
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
鸡嗜铬蛋白B(CgB) ELISA 试剂盒
样品准备
1. 手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量
2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管
3. (选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎组织
5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6. 加入预冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 涡旋震荡5秒,充分混匀
8. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约40至80下)
9. 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
10. 放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升离心管
12. 加入xx微升 稳定液(Reagent B),混匀
13. 放在冰槽里待测(注意:须1周内使用)