人转铁蛋白(TF)ELISA试剂盒

【背景】：转铁蛋白(TF)是一种分泌蛋白，属于转铁蛋白家族，是由肝脏表达并分泌到血浆中。 TF 分子量约为 80 kDa， 包含两个特异的高亲和力 Fe3+ 结合位点。 TFs 是存在于血浆中的铁结合糖蛋白，可调控生物体液中的游离铁水平，它的主要作用是从十二指肠吸收中心和白细胞巨噬细胞转运铁到其它组织。TF 与先天免疫系统有关。在炎症状态下，它的水平会降低。我们常见到缺铁性贫血患者中的血浆 TF 水平是增加的。而铁超负荷和蛋白质营养不良患者中的血浆 TF 水平通常是降低的。最近，人们发现当 TF 受体吸引抗体时， TF 及其受体可减少肿瘤细胞。 TF 是一种急性期蛋白，因此在炎症、 癌症和某些疾病中它的水平是下降的。

【检测原理】：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 TF单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的 TF与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中 TF浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长测定吸光度值。                                                                                  

【实验方法】：双抗夹心ELISA（定量）                                                                                                                         

【样本类型】：血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。                                                                                                 

【规格型式】：96孔板、48孔板，可拆卸                                                                                                                                             

【保存条件】：试剂盒未拆开，2-8℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。                                                                           

【有效期】：6个月。                                                                                                                                                     

【检测范围】：937.5-60000pg/ml。                                                                                                                                  

【灵敏度】：5.0pg/mL。敏感性/最低检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。                                                                                                                                                                                               

【变异系数】：板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。                                                                                                                                          

【回收率】：三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。

【需用户自己提供的实验器材和试剂】：                                                                                                                                              1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。