【背景】:钙调素样蛋白 5 (CALML5), 又名钙调素样皮肤蛋白(CLSP),在人类中由 CALML5 基因编码。它丰富存在于表皮中,表皮中 CALML5 的表达量直接关系到角质形成细胞的分化。 在肺中,它的表达很低。 CALML5 结合钙,可能参与角质形成细胞的终末分化,且与柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)紧密相关。
【检测原理】:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人CALML5单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的CALML5与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中CALML5浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
【实验方法】:双抗夹心ELISA(定量)
【样本类型】:血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。
【规格型式】:96孔板、48孔板,可拆卸
【保存条件】:试剂盒未拆开,2-8℃保存。已拆开,标准品-20℃保存,其它2-8℃℃保存。
【有效期】:6个月。
【检测范围】:46.88-3000pg/ml。
【灵敏度】:1.5pg/mL。敏感性/最低检测浓度计算方式:敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。
【变异系数】:板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。
【回收率】:三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次回收率评估,回收率在85%-115%之间。
【需用户自己提供的实验器材和试剂】: 1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。