口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体定性检测试剂盒

背景：仅供科研使用，口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。本试剂用于检测牛、羊、猪血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，可用于口蹄疫亚洲Ⅰ型疫苗免疫效果评价。

                                                                                                                      检测原理：本试剂盒系由预包被口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体的酶标板、抗体工作液、抗原液酶标记物及其他配套试剂组成，应用阻断酶联免疫法（ELISA）原理检测牛、羊、猪血清样本中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。实验时将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育，样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原，阻断抗原与板的结合；经洗涤后，再加抗体工作液孵育；经洗涤后加入酶标记物孵育；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。

                                                                                                                       
实验方法：阻断法ELISA（定性）                                                                                                                         

样本类型：血清、血浆等。                                                                                                                         

规格型式：96孔板                                                                                                                                      

保存条件：试剂盒未拆开，2-8℃保存。                                                                                                          

有效期：6个月。                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               

参考值：实验正常的情况下，阴性对照A值≥1.0，阳性对照A值≤50%×阴性对照A值。
检验结果的解释：
1.PI（阻断率）=（1-样本A值/阴性对照孔平均A值）×100%，PI≥50%为阳性；PI＜50%为阴性。
2.本实验检测结果为阳性时表明待检样本中含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，且效价高于1:128，达到保护水平。
3.本实验检测结果为阴性时表明待检样本中不含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，或效价低于1:128，未达到充足保护水平。
4.如需了解样本抗体的最终效价，可将样本进行梯度稀释，使PI≥50%的最高稀释比例即为该样本抗体的最终效价。

试验方法的局限性:
该试验仅作为定性牛、羊、猪血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。                                                                                                                                                                                                                                                            

需用户自己提供的实验器材和试剂：                                                                                                                                              1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。