禽流感H5N1病毒抗体定性检测试剂盒

背景：仅供科研使用，禽流感又名真性鸡瘟或欧洲鸡瘟，是由A型禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的禽类的一种急性、高度致死性传染病，以急性败血性死亡到无症状带毒为特征。本试剂用于检测鸡、鸭、鹅等禽类血清、血浆或蛋黄中A型禽流感H5N1病毒抗体，可用于免疫效果评价、辅助诊断等。


                                                                                                                   检测原理：本试剂盒系由预包被禽流感H5N1病毒抗原的酶标板、抗体工作液、酶标记物及其他配套试剂组成，应用竞争酶联免疫法原理检测禽类血清、血浆或蛋黄中A型禽流感H5N1病毒抗体。实验时在酶标板中加入稀释的待检样本和抗体工作液，若样品中含有禽流感H5N1病毒抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合，从而使后续反应不出现显色；反之则出现显色；显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有A型禽流感H5N1病毒抗体。


                                                                                                                      
实验方法：阻断法ELISA（定性）                                                                                                                         

样本类型：血清、血浆等。                                                                                                                         

规格型式：96孔板                                                                                                                                      

保存条件：试剂盒未拆开，2-8℃保存。                                                                                                          

有效期：6个月。                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               

参考值：实验正常的情况下，阴性对照吸光值≥1.0，阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。

检验结果的解释：
1.PI（阻断率）=（1-样本值/阴性对照孔均值）×100%，PI≥50%为阳性；PI＜50%为阴性。
2.未曾免疫鸡群：结果为阳性时表明可能有感染，需结合临床资料进行分析。
3.免疫鸡群：监测并记录样本当时的抗体水平，根据结果分析抗体水平的分布及鸡群免疫状态的动向。

试验方法的局限性:
该试验仅作为定性检测禽流感H5N1病毒抗体，根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。                                                                                                                                                                                                            

需用户自己提供的实验器材和试剂：                                                                                                                                              1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。