猪乙脑病毒抗体定性检测试剂盒（ELISA）

背景：仅供科研使用，猪乙型脑炎又名日本乙型脑炎是由猪乙脑病毒（Porcine Japanese Encephalitis Virus，JEV）引起的一种蚊媒性、急性人畜共患传染病，病猪主要表现为妊娠母猪流产、产死胎，公猪睾丸肿。本试剂用于检测猪血清中猪乙脑病毒抗体，可用于猪乙脑病毒疫苗免疫效果评价。
                                                                                                                   检测原理：本试剂盒系由预包被猪乙型脑炎病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪乙型脑炎病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪乙型脑炎病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪乙型脑炎病毒抗体。

                                                                                                                      
实验方法：阻断法ELISA（定性）                                                                                                                         

样本类型：血清、血浆等。                                                                                                                         

规格型式：96孔板                                                                                                                                      

保存条件：试剂盒未拆开，2-8℃保存。                                                                                                          

有效期：6个月。                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               

参考值：实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。

检验结果的解释：
1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。

试验方法的局限性:
该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪乙型脑炎病毒抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
                                                                                                                                                                                                                
需用户自己提供的实验器材和试剂：                                                                                                                                              1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。