大鼠趋化因子C-C-基元配体3 (CCL3；MIP-1α) ELISA试剂盒

【背景】：趋化因子配体3 (CCL3)，又名巨噬细胞炎性蛋白1α (MIP-1α)，是CC趋化因子家族中的一种细胞因子，参与多形核白细胞招募和活化中的急性炎症状态。CCL3基因位于人类17号染色体上，其cDNAs编码92个氨基酸残基前体蛋白，该前体蛋白含有一段22个氨基酸残基信号肽，裂解该前体蛋白可产生分泌性的成熟蛋白。和其它趋化因子一样，CCL3是单核细胞趋化物。另外，有报道认为CCL3对T淋巴细胞、NK细胞、细胞毒性T细胞、B细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞有不同的趋化和促粘附作用。CCL3已被确定为是一种干细胞抑制剂(SCI)，可抑制造血祖细胞在体外和体内的增殖。CCL3、CCL4和RANTES被认为是由CD8+ T细胞产生的重要的HIV抑制因子。

【检测原理】：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗大鼠CCL3单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的CCL3与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中CCL3浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长测定吸光度值。                                                                                  

【实验方法】：双抗夹心ELISA（定量）                                                                                                                         

【样本类型】：血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。                                                                                                 

【规格型式】：96孔板、48孔板，可拆卸                                                                                                                                             

【保存条件】：试剂盒未拆开，2-8℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。                                                                           

【有效期】：6个月。                                                                                                                                                     

【检测范围】：6.25-400pg/ml。                                                                                                                                  

【灵敏度】：0.1pg/mL。敏感性/最低检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。                                                                                                                                                                                               

【变异系数】：板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。 【回收率】：三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。 【需用户自己提供的实验器材和试剂】： 1. 96孔读板仪器。 2. 自动洗板机. 3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。 4. Eppendorf 管。 5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。 0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。