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SNaPshot法基因分型介绍
SNaPshot基因分型技术是由美国ABI公司开发的一种基于荧光标记单碱基延伸链终止反应原理的分型技术,主要针对中小通量的SNP分型项目。简单说来,在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临SNP位点5’-端的不同长度延伸引物和模板DNA的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI 3730XL测序仪检测后,根据峰的位置确定该延伸产物对应的SNP位点,而根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。同时,通过多重PCR反应体系,可以同时检测多种SNP位点,通常可以用于10-35个SNP位点的同时分析。
技术原理
实验流程
1、样本采集。
2、PCR扩增。
3、PCR产物纯化。
4、毛细管电泳检测。
5、数据分析。