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试剂名称: | 295-50201 生物制药残余DNA抽提试剂盒 |
英文名称: | DNA Extractor® Kit |
国产/进口: | 进口 |
产地/品牌: |
日本 |
规格: | 瓶 |
货号: |
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CAS号: |
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参考报价: | 详询 |
销售商: | 西宝生物科技(上海)股份有限公司分析部 |
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产品类别: | 神经生物学试剂 |
西宝生物科技(上海)股份有限公司
地址:上海市浦东新区周浦镇芙蓉花路118弄2号楼 邮编:201204
电话:021-60496554
文刚 手机:13296136554 QQ:2867959799 lifesci13@seebio.cn
西宝生物(Seebio)--优势品牌 Wako、Jackson、 Abcam Lumiprobe、APSC、Biomatrica、Elicity、Ludger、Laysan
西宝生物(Seebio)特色产品:糖类标准品,脂肪酸标准品,花青素标准品,类胡萝卜素标准品等食品分析标准品
原理
在工业生产的疫苗和治疗用生物制品(干扰素、白细胞介素、单克隆抗体、重组蛋白)中,宿主细胞残余DNA 污染直接影响最终产品和整个生产过程的质量和产量,可能引起动物致瘤、感染病毒DNA 等严重后果, 中国药典、WHO、EU、FDA对宿主细胞DNA 残留限量都有规定。传统的DNA 提取方法蛋白酶K-SDS 法在SDS的稳定和促进下降解细胞中的蛋白质特别是核酶,再经有机溶剂萃取得到高质量的DNA,但有提取时间较长和使用有毒溶剂氯仿和苯酚等缺点。该产品 是血清中病毒DNA 和生物制品宿主细胞残余DNA 的提取试剂盒。使用新型提取步骤,用碘化钠(NaI)作为促溶剂,稳定且灵敏度高、时间短,无有毒溶剂,无需复杂和费力操作,即可从样品中得到高质量和高 回收率的DNA。
文刚 手机:13296136554 QQ:2867959799
◆特点
● 可与Threshold 系统配合使用进行DNA 定量分析
● 高灵敏度,可提取低至10 pg 的DNA
● 单独的离心管无交叉污染,提取的DNA可用于下游实验
● 可获得高质量高回收率的DNA
试剂盒组成
试剂盒组成(50 次反应):
1. 碘化钠溶液 1 x 26 ml
2. 月桂酰肌氨酸钠溶液 1 x 1.2 ml
3. 洗涤液 (A) 1 x 42 ml
4. 洗涤液 (B) 2 x 40 ml
5. 糖原溶液 1 x 0.1 ml
Wako DNA 提取试剂盒产品选择
样品 |
全血 |
血清 |
血浆 |
组织 |
石蜡包埋 组织切片 |
生物制药 |
培养细胞 |
头发、指甲 血迹、唾液 |
• DNA Extractor® WB Kit |
• DNA Isolator PS Kit |
|||||||
基因组 DNA |
• DNA Extractor® WB-Rapid Kit |
• DNA Extractor® WB Kit |
• DNA Isolator PS-Rapid Reagent |
• DNA Extractor® WB Kit |
• DNA Extractor® FM Kit |
|||
线粒体 DNA (mtDNA) |
• mtDNA Extractor® WB Kit |
• mtDNA Extractor® CT Kit |
• mtDNA Extractor® CT Kit |
|||||
游离 DNA |
• DNA Extractor® SP Kit |
• DNA Extractor® SP Kit |
||||||
低氧化程度的 DNA |
• DNA Extractor® WB Kit |
• DNA Extractor® TIS Kit |
• DNA Extractor® TIS Kit |
|||||
细菌基因组 DNA |
• DNA Extractor® Kit |
• DNA Extractor® Kit |
◆案例・应用
生物制药中DNA残留检测——DNA Extractor®Kit
宿主细胞DNA(Host Cell Proteins) 对
于具有商业规模的生物药品中,治疗性蛋白药物在细胞培养中的表达是一种比较便宜有效的方法。但是这些产品在生产和纯化过程中,很容易引起宿主细胞DNA残
余污染。尽管残余宿主细胞DNA对治疗性蛋白药物的影响在很大程度上还是未知的,但是也有研究表明宿主细胞DNA可能包含一些有害的DNA片段,使其具有
传染性和致瘤性。因此,在生物制药中,对宿主细胞DNA的检测是非常有必要的。
Wako(日本和光纯药)对于生物制药中的宿主细胞DNA残留,可提供以下试剂:
DNA Extractor® Kit
295-50201 50 tests
特点
可与Threshold系统配合使用进行
能用于生物制药、血清中的DNA提取
单独的离心管无交叉污染,提取的核酸可应用于下游实验
可获得高质量高回收率的DNA
使用的方法为碘化钠法(Sodium Iodide Method),比传统的方法更为环保
高灵敏度,可提取低至 10 pg 的 DNA
◆DNA Extractor® Kit 实验方案
方案1:血清中DNA 提取操作步骤
试剂准备:
1) DNA 提取之前,试剂提取如下:
26 ml 碘化钠溶液加入 6 ml 蒸馏去离子水稀释,
再加入 1 ml 月桂酰肌氨酸钠和 65 μl 糖原溶液并混合均匀。
2) 向洗涤溶液(B)加入 2 μl 糖原溶液并立即混合均匀。
注意事项:
1)用于稀释 Nal 溶液的蒸馏去离子水须去除 DNA。
2)配制好的洗涤溶液(B)在 4℃至少能保存一周。如果需要少量的洗涤溶液(B),加入糖原 溶液到无菌离心管中至
合适体积即可。
3)在保存期间 Nal 溶液会结晶,加热溶液至 50℃可帮助溶解。 DNA 提取步骤:
1)吸取 100 μl 的血清样品加入 1.5 ml 微量离心管;
2)再加入 300 μl 配制好的 Nal 溶液至离心管并混合均匀;
3)将离心管在 60℃恒温容器中加热 15 分钟;
4)取出离心管,加入 400 μl 异丙醇至离心管并混合均匀;
5)离心管在室温静置 15 分钟后离心 10,000 g 15 分钟;
6)尽可能多地吸取上清液,将离心管倒置在纸面上除去残留溶液;
7)加入 1 ml 配制好的洗涤溶液(B)重悬浮得到的白色沉淀,并使白色沉淀从离心管壁上弹开;
8)短暂离心 10,000 g 5 min,去除上清液,将剩余沉淀真空干燥,用于后续的 DNA 分析。
方案 2: Threshold* 系统 DNA 定量法的预处理
试剂预处理 :
1) 将 65 μl 糖原溶液加入 26 ml 碘化钠溶液;
2) 将 2 μl 糖原溶液加入 40 ml 洗涤溶液(B),立即混合均匀。
注意事项:
1) 用于稀释碘化钠溶液的蒸馏去离子水须去除 DNA。
2) 配制好的洗涤溶液(B)在 4℃至少能保存一周。如果需要少量的洗涤溶液(B),加入糖原溶液到无
菌离心管中至合适体积即可。
3) 在保存期间碘化钠溶液会结晶,加热溶液至 50℃可帮助溶解。
4) 提取步骤应在 DNA 变性之前,因此重要的是使用无菌技术尽可能降低 DNA 污染。预先包装好的无
菌吸管、无菌试管和手套都要经过此步骤。
DNA 提取步骤:
1) 吸取 400 μl 或 500 μl 的样品加入 2 ml 无菌带盖微量离心管并混合均匀;
2) 吸取 20 μl 的月桂酰肌氨酸钠溶液加入微量离心管并混合均匀;
3) 再加入 500 μl 包含糖原的碘化钠溶液至混合溶液,涡旋后在 40℃保温 15 分钟;
4) 加入 900 μl 异丙醇至混合溶液,涡旋后静置于室温 15 分钟;
5) 短暂离心 10,000 g 15 min 后,能看见管壁有白色沉淀,吸取上清液后将离心管倒置于纸面去
文刚 手机:13296136554 QQ:2867959799
除残留溶液;
6) 加入 800 μl 洗涤溶液(A)至离心管,剧烈涡旋使白色沉淀从离心管壁上弹开;
7) 短暂离心 10,000 g 5 min 后,去除残留溶液;
8) 加入 1500 μl 包含糖原的洗涤溶液(B)至离心管并涡旋,短暂离心 10,000 g 5 min 后吸取上清液,
剩余的白色沉淀包括 DNA 和糖原载体;
9) 加入分析用缓冲液 (Zero Calibrator buffer) 使白色沉淀溶解,用于后续的 DNA 分析。
注意事项:
请于各步骤使用搅拌器将溶液搅拌均匀。样品溶液里含有 DNA 酶时,进行步骤 2 之前请先进 行步骤 3。步骤 4 里样品溶解不完全时,请把保温温度升至 40 - 60℃帮助溶解。但是含有部分蛋白(γ- 球蛋白)或高浓度蛋白的样品(> 50 mg/ml),加热可能会导致蛋白聚集,请注意。
* 为 Molecμlar Devices 公司注册商标,是使用生物传感器的高灵敏度分析装置。
参考文献
1. Ishizawa, M., Kobayashi, Y., Miyamura, T. and Matuura,: Simple Procedure of DNA isolation from human seru
Nucleic Acids Res., 19, 5792 (1991)
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 |
295-50201 |
DNA Extractor Kit 生物制药残余DNA抽提试剂盒 |
50Tests | for Genetic Research |
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Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
【制造商】wako
【销售商代码】295-50201
【规格】50Tests
【价格】咨询客服 021-60496554
【保存条件】Keep at RT.
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
【注意事项】This product is for research use only. Do not administer it to human.
【参考文献】Molecular Biology-DNA Extraction Kits. Detects and quantitates contaminant DNA in serum and residual DNA in biopharmaceuticals. Employs a new extraction procedure for DNA purification from a single tube. This procedure, using Sodium Iodide (NaI) as a chaotropic agent, realizes DNA isolation of both high quality and high recovery from biological fluids without the use of phenol or chloroform. Complex and laborious manipulations are avoided when using Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
this kit. In addition, this kit has a modified application for use with Molecular Devices' Threshold(TM) System. PRINCIPLE of DNA EXTRACTION: A high concentration of chaotropic reagent, NaI, and an anionic detergent participate in solubilization of the proteins and lipids contained in biological samples. After addition of isopropanol to the mixture, nucleic acids are co-precipitated with polysaccharide glycogen as a carrier, while other components remain soluble in the solution phase. Ref.: Ishizawa, M., Kobayashi, T. and Matsuura, S., ''Simple procedure of DNA Isolation from Human Serum'', Nucleic Acids Res., 19, 5792 (1991).
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
上海子起_生物常年提供以下产品 现货或准现货!订购热线: 021-50272978
货号 品名 规格 Cas
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Dihydrochloride 500g 27776-21-2
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017-19362 2,2'-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane] Dihydrochloride 25g 27776-21-2
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pH4.01 (25 degrees C) 500mL -
028-03205 Buffer Solution Standard (Tetraborate pH Standard Solution)
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077-03155 Gelatin 500g 9000-70-8
081-00136 Heparin Sodium 10mu 9041-08-1
088-00705 L-Histidine Hydrochloride Monohydrate 500g 5934-29-2
093-06471 Insulin, Human, recombinant 50mg -
097-06474 Insulin, Human, recombinant 1g 11061-68-0
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125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 5x20μg -
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129-02541 Lysyl Endopeptidase( R) 10AU -
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130-07871 Melibiose 5g 585-99-9
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028-17811 BES-H2O2-Ac 1mg -
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039-23511 CultureSure? Freezing Medium 100ml -
041-18861 Dexamethasine 1g 50-02-2
042-29445 Dibasic Sodium Phosphate Hydrate 500g 10039-32-4
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Human, recombinant, Animal-derived-free 50ug 106096-93-9
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075-03075 Gellan Gum 500g 71010-52-1
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138-07872 Melibiose 25g 585-99-9
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
145-08221 Nuclease P1 500u 54576-84-0
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162-09115 Polyethylene Glycol 4,000 500g 25322-68-3
163-03545 Potassium Chloride 500g 7447-40-7
164-21655 N/400 Potassium Polyvinyl Sulfate Solu 500mL 26837-42-3
191-01785 Trisodium Citrate Dihydrate 500g 6132-04-3
193-02041 Glycerol 2-Phosphate Disodium Salt n-Hydrate 100g 819-83-0
195-12854 Streptavidin, from Streptomyces avidinii 5mg 9013-20-1
195-16031 StemSure (R) Freezing Medium 100ml -
196-00015 Sucrose 500g 57-50-1
196-08675 Sodium Dodecyl Sulfate 500g 151-21-3
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
197-07485 Sodium Sulfate 500g 7757-82-6
199-02825 Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate 500g 13472-35-0
203-17561 Trichostatin A 1mg 58880-19-6
207-00055 L(+)-Tartaric Acid 500g 87-69-4
208-08385 1mol/l Triethylammonium Hydrogencarbonate Solution 500mL 15715-58-9
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225-02111 VA-044 100g 27776-21-2
165-09105 Polyethylene Glycol 2,000 500g 25322-68-3
165-17035 Polyvinylpyrrolidone K 30 500g 9003-39-8
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169-04245 Potassium Dihydrogen Phosphate 500g 7778-77-0
169-09125 Polyethylene Glycol 6,000 500g 25322-68-3
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货 021-60496554
185-01003 Rifampicin 5g 13292-46-1
186-01114 all-trans-Retinoic Acid 50mg 302-79-4
189-01001 Rifampicin 1g 13292-46-1
190-05535 Trisodium Citrate Dihydrate 500g 6132-04-3
191-01665 Sodium Chloride 500g 7647-14-5
227-01071 Valproic Acid 5g 99-66-1
231-02011 Wetting Tension Test Mixture No.52.0 50mL -
232-01941 Wetting Tension Test Mixture No.42.0 50mL -
233-01971 Wetting Tension Test Mixture No.45.0 50mL -
234-02001 Wetting Tension Test Mixture No.50.0 50mL -
235-01931 Wetting Tension Test Mixture No.41.0 50mL -
Wako 295-50201 DNA Extractor? Kit 和光纯药 现货
235-02031 Wetting Tension Test Mixture No.56.0 50mL -
236-01961 Wetting Tension Test Mixture No.44.0 50mL -
238-01921 Wetting Tension Test Mixture No.40.0 50mL -
238-02021 Wetting Tension Test Mixture No.54.0 50mL -
238-02141 Wetting Tension Test Mixture No.73.0 50mL 7732-18-5
253-00513 Y-27632 5mg 331752-47-7
257-00511 Y-27632 1mg 331752-47-7
290-34251 Presep-C DNPH 20EA -
296-63801 LabAssay? Phospholipid 1300tests -
298-64101 Fructooligosaccharides standard set set -
Wako 295-50201 DNA Extractor Kit 和光纯药 现货
302-93561 Phos-tag (TM) Agarose 0.5mL -
304-93521 Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 10mg -
304-93521 Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 10mg -
290-34251 Presep-C DNPH 20EA -
290-63701 LabAssay? Triglyceride 1000tests -2016-2-29
290-65901 LabAssay? Creatinine 500tests -
291-58601 Lab Assay ALP 900tests -
293-51601 Endotoxin Extracting Solution for LAL Test 10mL x 4 -
294-62001 DsDD cDNA Subtraction kit Wako 5tests -
294-63601 LabAssay? NEFA 750tests -
294-65801 LabAssay? Cholesterol 1000tests -
295-50201 DNA Extractor? Kit 50tests -
295-51301 Limulus ES-II Single Test Wako 25 tests -
295-51301 Limulus ES-II Single Test Wako 25 tests -
Wako 295-50201 DNA Extractor Kit 和光纯药 现货
295-73401 Fructooligosaccharides Set Set -
304-93526 Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3ml -
305-93551 Phos-tag? Mass Analytical Kit set -
308-93541 Phos-tag (TM) Biotin BTL-105 10mg -
308-93563 Phos-tag (TM) Agarose 3mL -
308-97201 Phos-tag Biotin BTL-1111 1mM Aqueous Solution 0.1000mL -
325-88521 Lipase PS Amano SD 10g -
298-65701 LabAssay? Glucose 1000tests -
300-93523 Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 2mg -
Wako 295-50201 DNA Extractor Kit 和光纯药 现货
301-93531 Phos-tag (TM) Biotin BTL-104 10mg -
301-99413 Phos-tagTM Biotin BTL-104 1mM Aqueous Solution[for Campaign] 0.1mL 753451-66-0
302-93522 Phos-tagTM Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution[for Campaign] 0.3mL 871839-54-2
631-00651 Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0) 20mL -
637-00653 Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0) 100mL -
637-00653 Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0) 100mL -
638-01021 Endotoxin Standad /JPSE 10000un -
986-10001 Anti asialo GM1 (Rabbit), (014-09801) 1mL 617-45-8
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