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可通过棋盘滴定法进行测定,但用单项滴定法更为简便,其方法是将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为最适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。
用抗原或抗体蛋白包被固相载体时选择的浓度要适当。小鼠转化生长因子βELISA Kit价格/TGF-β进口ELISA试剂盒说明书如浓度太高,则低效价抗体可能测不出来,或包被过量形成多层抗原吸附,故在操作过程中可能脱落从而降低敏感性和可重复性。用最适稀释度抗原,包被固相载体不仅经济,而且可以克服前带现象。那么用多大浓度抗原进行包被最为合适呢?
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