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BTP-磷酸化定量蛋白组学研究
磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性,以及磷酸基团的供体ATP的易得性,使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受成为一种最普遍的调控手段。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等生命活动的所有过程,并且可逆的蛋白质磷酸化是目前所知道的最主要的信号转导方式。
由于翻译后修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广,质谱分析前需要对修饰进行富集以提高其丰度,然后利用传统的定量蛋白组学分析手段对富集得到的磷酸化肽段样品进行定量分析。 百泰派克公司可根据实验需要,选择固相金属亲和色谱富集(IMAC)、磷酸化抗体富集或TiO2富集,实现样本的高效富集;并且在富集肽段的过程中,基于之前的实验经验实现对于单磷酸化肽段和多磷酸化肽段的分步分离,然后分别进行质谱分析,保证了多磷酸肽段在质谱分析过程中因为离子化效率的问题对单磷酸化肽段鉴定和定量的影响。
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出磷酸化定量蛋白组分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、磷酸化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
关于样品
1. 如果您提供的是组织样品,请您干冰将组织样品寄给我们;植物组织样本最少200mg,血液样品至少1ml(血浆注意用EDTA防凝),血清0.5ml,尿液2ml,动物组织样品至少1g,细胞样品为5X107个细胞,酵母、微生物等干重200mg。
2. 如果您提供的是蛋白样品,请您保证蛋白总量在1mg以上;蛋白提取时使用普通的组织、细胞裂解液即可。
3. 样品运输:请使用足量的干冰运输,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
4. 在正式实验之前,我们都会对您提供的样品进行检测,检测合格后开始正式试验。
中/英文项目报告
在最终的技术报告中,百泰会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 翻译后修饰位点信息
4. 原始数据
5. 生物信息学分析
研究案例
该项目是中国科学院生物物理所一位老师Co-IP样品在百泰派克进行蛋白泛素化修饰位点鉴定。得到的部分结果如下图所示:
一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告