|
蛋白质氨基酸序列的特定位置可以与化学基团或者小分子量的蛋白共价结合从而发生蛋白质翻译后修饰(post-translational modifications,PTMs),相较于没有发生修饰的蛋白,PTMs会导致特定序列分子量的增加。
百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,以及Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,为广大科研工作者提供磷酸化/糖基化/泛素化/乙酰化/甲基化/二硫键/亚硝基化等翻译后修饰鉴定。
蛋白质翻译后修饰分析鉴定的原理
在蛋白翻译后修饰方式的鉴定过程中,蛋白会首先被酶切成肽段,然后进入质谱进行分析;通过质谱分析,得到的是一系列肽段的分子质量信息。对于某一个特定肽段而言,在没有发生任何翻译后修饰的情况下,其序列信息和分子量是确定的;当它发生了某种翻译后修饰之后,例如磷酸化修饰,起序列信息和分子量也是确定的,尽管分子量在原来的基础上增加了一个特定的磷酸根分子量,毕竟磷酸根的分子量是确定的;假如某个肽段在质谱检测过程中发现其中的部分肽段的分子量刚好增加了一个磷酸根的分子量,那这个肽段就发生了磷酸化修饰;当然,最终时候发生磷酸化修饰是通过二级质谱图进行确认。
蛋白质翻译后修饰质谱分析示意图
关于样品
胶内样品和溶液样品均可以用来进行翻译后修饰鉴定
需要的靶蛋白样品量:5-10ug,少于上述样品量也可进行检测
注意: 溶液样品尽量避免使用SDS和高盐浓度,特别是在样品量较少的情况下。
中/英文项目报告
在最终的技术报告中,百泰会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 翻译后修饰位点信息
4. 原始数据
5. 生物信息学分析
研究案例
该项目是中国科学院生物物理所一位老师Co-IP样品在百泰派克进行蛋白泛素化修饰位点鉴定。得到的部分结果如下图所示:
我们提供一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告