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一、服务简介
荧光素酶 (Luciferase)报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测Luciferase活性的一种报告系统。Luciferase可以催化luciferin为氧化荧光素,并发出生物荧光。
双荧光素酶报告基因系统指的是在同一细胞中同时表达两种荧光素酶——萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶,利用一个报告基因作为内参来校正另一个报告基因,从而减少细胞活性和转染效率对实验结果的影响,使数据更准确。
二、技术应用
1、将待测启动子构建至荧光素酶基因的上游,检测启动子活性;
2、在转染启动子荧光报告基因载体的同时转染转录因子的表达载体,检测转录因子与目标启动子的相互作用;
三、技术优势
1、灵敏度高,细胞内均无两种荧光素酶的底物,无内源性干扰;
2 、检测范围宽,大于7个数量级;
3、检测速度快,样品无需孵育等预处理;
4、操作简便,可以在同一管内完成2个荧光素酶的检测。
四、服务内容
1、构建荧光素酶载体(或客户自备载体);
2、细胞培养与转染;
3、荧光素酶检测;
4、数据分析。
五、服务须知
服务项目 | 客户提供 | 交付产物 | 实验周期 |
启动子活性检测 |
1、待测启动子序列 2、含待测启动子的质粒模板 3、待转染的细胞和培养信息 |
1、构建好载体的质粒和甘油菌 2、荧光素酶检测原始数据 3、数据分析结果 |
3-5周 |
转录因子与目的基因启动子区相互作用检测 |
1、待测启动子、转录因子序列 2、含待测启动子的质粒模板 3、含待测待转录因子的质粒(可由我方构建) 4、待转染的细胞和培养信息 |
1、构建好载体的质粒和甘油菌 2、荧光素酶检测原始数据 3、数据分析结果 |
3-5周 |