SILAC实验技术服务

一、SILAC概述

     细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture，SILAC)，利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸（主要是Lys和Arg）培养基培养细胞，来标记细胞内新合成的蛋白质，一般培养5-6代，细胞中的蛋白质将都被同位素标记。不同处理的蛋白样品等量混合，经SDS-PAGE分离，切胶，酶消化，LC-MS/MS分析即可得到有关蛋白的定量及定性结果。

     SILAC在比较蛋白质组学，蛋白与蛋白互作，蛋白与DNA互作，蛋白与RNA互作等研究领域均有广泛应用。

二、与体外标记技术相比，SILAC有以下优势

1、高通量，可同时标记细胞内的蛋白，与质谱联用可同时分析鉴定多种蛋白；

2、同位素标记效率高、稳定，不受裂解液影响，结果重复性好，可信度高；

3、灵敏度高，实验所需蛋白量明显减少；

4、体内标记，结果更接近真实生理状态。

三、SILAC技术流程

图1：SILAC技术流程

四、SILAC技术服务内容

1、细胞同位素标记；（本公司出售L、M和H型同位素Lys和Arg）

2、样本制备与定量；

3、SDS-PAGE分离；

4、胰酶酶切、LC-MS/MS分析；

5、蛋白质定性及定量分析；

6、差异蛋白的生物信息学分析

7、实验报告整理。

五、方案咨询及SILAC适用

1、方案咨询：不同的实验目的，需设计不同的SILAC实验方案，具体请咨询我司。

2、SILAC适用：能标记活的可传代细胞、细菌等材料，不能标记组织、体液等样本，详情请咨询我司。

六、实验报告内容

1、蛋白定鉴定和SILAC定量分析结果；

2、指定蛋白质对应的质谱峰图；

3、完整的SILAC实验步骤，包括所使用的仪器、软件检索参数等。

七、实验周期及收费标准：请咨询我司

八、质量承诺

1、科学合理的SILAC实验方案确保定量分析结果可靠；

2、提供客观的SILAC实验分析结果。

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