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美国Jackson ImmunoResearch
Inc.为全球著名的二抗生产商,成立于1982年,专业致力于亲和纯化的二抗和纯化的免疫球蛋白的生产及偶联,30余年的专注,30余年的发展,Jackson的二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而深受国际科研学者和工业客户的青睐。
西宝生物科技(上海)股份有限公司为Jackson
ImmunoResearch品牌在华授权代理商,公司不仅坚持提供传统标记的二抗(如酶标记,AMCA,FITC,罗丹明,Cy系列等),而且始终与最前沿的染料生产商合作,以最快的速度供应新型染料标记的二抗(如Alexa
Fluor®,DyLight 405)。若您对Jackson ImmunoResearch产品感兴趣,请致电021-50272978 了解详情。
广泛的应用范围
二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。Jackson
ImmunoResearch二抗可用于以下领域:
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免疫荧光
免疫组织化学
免疫细胞化学
Western
blotting
流式细胞术
原位杂交
电子显微镜
超级解析度显微镜
双光子显微镜
ELISA
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齐全的二抗品种
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Whole
IgG抗体是从抗血清中分离出来的完整的分子。这些抗体有一个Fc部分和两个与抗原结合的Fab部分,因此是二价的。Whole
IgG抗体适用于多数情况,也是性价比最高的。
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F(ab’)2片段抗体是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分,剩下两个靠二硫键连接的结合抗原的Fab部分(依然是二价的)。这些抗体用在特定的情况中,例如避免抗体与Protain
A 或G结合,或者与有Fc受体的活细胞结合。
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Fab片段抗体是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的。这些抗体只含有一个结合位点。它们用来封闭内源性的免疫球蛋白,或者在使用相同物种来源的一抗作多标记的实验中,用于封闭暴露的免疫球蛋白。
如何选择Jackson二抗?
Step1:三种形式亲和纯化的二抗的选择——Whole
IgG 、F(ab')2 片段或Fab片段;
Step2: 确定一抗的物种来源,抗体是根据一抗的物种来源的字母表顺序排列。比如,如果一抗是小鼠来源的,就找“anti-mouse”;
Step3:选择二抗的物种来源;
Step4:选择二抗的特异性。
注意:不同来源的免疫球蛋白含有相似的结构,抗体的生成过程也相似。抗一个物种的抗体可能与其他物种发生交叉反应,除非事先特殊处理过-这时会标有“(min X …Sr
Prot)。下面词语的解释将对选择合适的抗体有所帮助:
这类抗体和IgG分子的重链和轻链都可以反应,比如,和IgG分子的Fc,F(ab’)2/Fab部分。Anti-IgG
(H+L)抗体也可以和其他的免疫球蛋白家族反应(比如IgM和IgA),因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链(κ链,或者λ链)。Anti-IgG
(H+L)抗体比只抗片段的抗体识别更多的抗原表位。
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Anti-IgG,Fc fragment specific
这类抗体和IgG重链的Fc部分反应。它们通过了ELISA检测,和/或针对Fab片段吸附的测试。某些情况下,这类抗体需要额外检测和处理来降低和IgM或IgA的交叉反应。在这种情况下(anti-human,-mouse,-rat),它们会被描述为“Anti-IgG,
Fcγfragment specific”。
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Anti-IgG,Fcγ Subclass specific
这类抗体分别和不同的小鼠IgG亚型重链的Fc部分反应。它们经过ELISA和/或针对Fab片段、IgM和其他小鼠IgG亚型的吸附测试。
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Anti-IgG,F(ab’)2 fragment specific
这类抗体和IgG的F(ab’)2/Fab部分反应。它们经过了ELISA和/或Fc片段的吸附检测。因为它们是和轻链反应,它们同时也和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应(如IgM和IgA)。
这类抗体经过了检测,以及针对IgG和圆括号中的物种的血清蛋白的吸附处理。当其他物种免疫球蛋白的出现可能导致交叉反应时,推荐使用这类抗体。但是,当要选择经过针对相近物种吸附处理的抗体时,要特别注意,因为它们能识别的表位数量大大减小了,可能识别单抗的能力很弱。
有些抗体标明了ML,来强调它们除了可以用于单标,还可用于多标记实验。
Step5:选择需要的探针;
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荧光团:传统与新型染料可选,包括Alexa Fluor® Fluorescent Dyes 、花青染料(Cy2, Cy3, and
Cy5)、DyLight 405、Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)、luorescein Isothiocyanate
(FITC) 、Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC), Rhodamine Red-X (RRX), Texas
Red (TR)等。
Table 1
Approximate peak wavelengths of excitation and emission for all
fluorophore-conjugated.
荧光团的选择依赖于:
A.仪器。比如,光源,滤片,检测系统。
B.多标记中对色彩区分程度的要求。比如,为更好的区分Alexa
Fluor® 488,选择短发射波长荧光素DyLight 405或长发射波长荧光素罗丹明红-X (RRX)、Alexa Fluor® 594或Alexa
Fluor® 647。
C.要求的灵敏度。比如,Alexa Fluor®
488较之FITC更亮。
Biotin-SP是Jackson用来命名和其耦联蛋白之间具有长连接的
生物素。在使用Biotin-SP耦联的抗体作酶免疫实验时,相比没有长连接的
生物素标记的抗体,灵敏度有很明显的提高。
Jackson提供两种不同的酶耦联物:辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸脂酶。
HRP耦联物是通过Nakane和Kawaoi过程制备的。过氧化物酶耦联物广泛应用于免疫组化,Western
blotting和ELISA中。碱性磷酸脂酶耦联物是通过优化过的Avremeas方法制备的复合物,具有高有效浓度和高分子量。它们比较灵敏,适合于固相的免疫检测实验比如ELISA和Western
blotting。
Figure 2 A
Product with the code number 115-096-072 should be described as above.
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