DIGE(2D-DIGE)实验技术服务

一、DIGE概述
         DIGE(双向荧光差异凝胶电泳,Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE)，是由传统双向电泳发展而来的新型蛋白质组定量技术，其分离蛋白的基本过程与传统双向电泳相同，主要利用蛋白质的等电点和分子量差异来分离蛋白质混合物。DIGE用三种荧光染料（Cy2, Cy3和Cy5）分别标记不同组别的蛋白，通常情况下，Cy3和Cy5分别标记对照组和实验组的蛋白，而Cy2标记对照组和实验组蛋白的混合物，作为内参使用。之后将三种标记的蛋白样品等量混合，在一张凝胶上进行双向电泳，电泳完凝胶用不同波长的激光扫描，即可得到三组标记蛋白蛋在同一张凝胶中的扫描图。胶图经专业软件分析对比，便可得到准确的定量信息。

二、与传统双向电泳(银染或考染胶)相比，DIGE技术服务具有以下优势：

 1、灵敏度高，可检测低至125 pg的蛋白质；

 2、高效，同一块凝胶上可以检测两个混合样品的蛋白表达情况，简化了实验流程，减少了操作误差；

 3、线性范围更广，动态范围高达10^-5；

 4、定量更精确，内标消除了凝胶与凝胶之间的实验误差，显著提高了结果的精确度和可重复性。

 5、统计学分析，ImageMaster7.0（DIGE）软件自动分析，得到统计结果，降低了人为分析偏差。

三、DIGE技术服务流程

图1：DIGE技术服务流程

对照组和实验组蛋白样品分别用Cy3和Cy5标记，同时将实验组与对照组的样品等量混合用Cy2标记，作为内标。之后等量混合三种荧光标记的蛋白样品，用2D-PAGE电泳分离，凝胶经荧光扫描后，用ImageMaster 7.0（DIGE)软件分析同一蛋白质在不同样品中的表达差异。

四、DIGE技术服务内容

  1、样本制备与定量；

  2、荧光标记；

  3、双向电泳和图片分析；

  4、实验结果分析及报告整理。

五、送样须知：

    样本应避免各类污染和反复冻融，妥善保存，用液氮或干冰保存寄送；广州本地客户可上门收样。

 注：DIGE荧光染料可标记多种类型的蛋白样本，如组织、细胞、细菌等材料，但不同类型的样本其蛋白需求量有所不同，具体请咨询我司。

六、实验服务报告内容

  1、DIGE荧光电子图片；

2、蛋白质点定量分析结果，包括差异点号码、差异倍数、pI和MW等；

  3、完整实验报告，包括实验步骤、使用试剂、仪器、软件检索参数等。

七、DIGE实验服务案例

八、实验服务周期及收费标准：请咨询我司

九、质量承诺：
  1、Cy2作为内标，有效保证定量的准确性；
  2、提供客观的DIGE实验分析结果。

十、欢迎索取顾客在辉骏生物做的DIGE技术服务所发表的样板文章。
查看部分客户发表SCI论文