CK8 Antigen

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产品货号:DM00180

形式：Purified(90%)

来源：Recombinant

应用:  Calibrator, Immunogen

规格: 100ug

上海笃玛生物科技有限公司CK8 Antigen在标记的免疫测定或其他技术中将特异性抗体纯化出来，是极为重要的。例如在ELISA，用于包被的抗体一定要用特异性IgG，才能得到良好的效果。这是因为全血清中有大量非抗体蛋白，如白蛋白、α1和α2球蛋白等，如不除去，会干扰包被。再如反相间接血凝，致敏红细胞的抗体也需用特异性IgG的I（ab＇）2才能使实验满意。特异性IgG和F（ab＇）2的制备方法有如下几种。

 

（一）粗提法提取球蛋白

 

大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀，第一次用40％饱和度，第二次用35％饱和度，第三次用33％饱和度，经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便，用20％即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG，但还有5％其他区带蛋白，如γ区的杂蛋白。又因IgG组分中还含其他所谓正常的IgG，产生干扰。因此盐析法粗提的γ球蛋白只能用于一般的实验，或者是抗体效价较高的免疫血清。

 

（二）离子交换层析法提取IgG

 

常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素，以QAE-Sephadex最为理想，DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5～8.6的磷酸盐缓冲液中平衡，将水分抽干，称湿重Ig加于10ml血清中，在室温30min后，离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次，即获得较纯的IgG，甚至不含其他杂蛋白。用该技术纯化IgG简便，不损坏抗体，既可小量提取，也可大量制备。

 

（三）亲和层析法提取特异性IgG

 

将纯化抗原或粗制抗原（如是单价特异性则对抗原要求不高）交联Sepharose4B制成亲和层析柱，将免疫血清过柱后洗去未结合的杂蛋白，再用硫氰酸钾洗脱，流出的是纯的特异性IgG抗体。因硫氰酸钾对抗体有破坏作用，应及时透析除去。纯化的IgG因含量低，失去保护作用，应及时应用或冻干保存，亦可20℃保存，但皆不理想；加入三乙醇胺或甘油可起保护作用。

 

（四）酶解法制备F（ab＇）2片段

 

胃蛋白酶对IgG的作用点是在连接两重链的二硫键靠C端处（232氨基酸处），结果两个Fab由二硫键连接，保留了抗体的结合点。与IgG相比，F（ab＇）2的特点是去掉了Fc段，这样在细胞免疫实验中免除了受体作用；同时也使IgG失去主要的抗原特性，不被抗IgG抗体结合；在反向间接血凝中，用F（ab＇）2致敏羊红细胞比用IgG效果好。

 

胃蛋白酶原(PGA Antigen -pepsinogen I, PG I) DM00178

胃蛋白酶原(PGC Antigen -pepsinogen II, PG II) DM00179

CK8 Antigen DM00180

CK18 Antigen DM00181

CK20 Antigen DM00182

P53 Antigen DM00183

DKK1 Antigen DM00184

人胰蛋白酶原II (TrypsinogenII，TG2) DM00185

人附睾蛋白4 (human epididymis protein 4,HE4) DM00186

人附睾蛋白4 (human epididymis protein 4,HE4) DM00187

膜糖蛋白73(GP73) 抗原 DM00188

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3，GPC3)Antigen DM00189

热休克蛋白90a （HSP90a） DM00190

胃泌素前体释放肽片段(Pro-GRP)antigen DM00191

ProGRP31-98 antigen DM00192

P185 antigen  (HER2/neu) DM00193