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1.说明
本检测采用酶联免疫法定量检测神经性贝毒的存在。神经性贝毒是一种毒素,与贝壳类动物的神经中毒有关。本检测可用于水产样本对贝类毒素的定性和定量检测,例如甲壳类动物的样本。对于甲壳类动物的需要提前制备样本。如果条件允许,阳性样本可以做HPLC,GC/MS或其他方法确认。
2.安全性说明
标准品溶液含有少量的神经性贝毒。底物溶液含有四甲基联苯胺,终止液还有稀硫酸。避免皮肤与粘膜与终止液接触。若终止液与皮肤接触,可用水洗去。
3.贮藏与稳定性
试剂盒贮存在4-8°C。使用前试剂盒中溶液要恢复到室温20—25度。在保质期内试剂盒都可以正常使用。
4.检测原理
本实验采用直接竞争ELISA方法,用特异性抗体识别神经性贝毒。样本中的神经性贝毒可与贝毒-酶-结合物竞争,同包被在微孔板上的羊抗-神经性贝毒抗体结合。洗板加入底物溶液,显蓝色。蓝色的深度与神经性贝毒在样本中的浓度成反比。颜色反应在规定时间内终止,颜色用酶标仪读值。每孔的样本浓度值可以通过标准曲线来读取。
5.试剂盒局限性和可能的干扰
样本中经常存在的大量的无机物和有机物经检测,并未为发现影响试剂盒的检测结果。然而,由于样本中发现有易变质的混合物,由它们引起的基质反应不可避免地会影响检测结果。操作失误也可能造成实验错误。如:贮存的问题。加样次序错误,加入溶液的体积错误,孵育的时间过长或者过短,影响免疫反应或者底物反应,实验过程中温度过低或者过高(低于10℃,大于30℃)。本试剂盒提供筛查神经性贝毒的筛查结果。阳性样本可采取其他的分析方法(GC,HPLC,其他方法)证明。
A 试剂盒包括
1. 包被绵羊抗-神经性贝毒的酶标板
2. 标准品PbTx-3 (8): 0, 0.010, 0.025, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 2.0 ng/ml
3. 辣根过氧化酶(HRP)-神经性贝毒结合物,6ml
4. 浓缩的样本稀释液(1X)2 X 30ml,用于稀释样本
5. 浓缩的洗液(5X),100ml
6. 显色液(TMB),12ml
7. 终止液,2 X 6ml
8.海水前处理溶液25ml