健忘性贝类毒素(ASP)检测试剂盒

1．概要

这个软骨藻酸（ASP）ELISA检测方法可以很敏感的定量检测软骨藻酸的含量。软骨藻酸是和健忘性贝类毒素相关的一类海藻产生的水溶性毒素。试剂盒用于定量或定性检测检测水样和贝类样品中软骨藻酸的含量。贝类样品需要进行样品前处理。如果需要可以用传统的方法例如HPLC,GC/MS来证实。

2．安全说明

试剂盒中的标准溶液里含有少量的软骨藻酸。底物中包含有四甲基联苯胺，终止液中含有稀硫酸。要避免

皮肤和粘膜与终止液接触，如果不小心接触了请马上用水冲洗。

3．保存和稳定性

试剂盒应保存在2-8℃，不要冷冻。在使用之前要把试剂盒中的溶液回复到室温（20-25℃）。有效期内试剂盒中的试剂都可以使用。

4．原理

试剂盒的原理是直接竞争ELISA法，通过特异性抗体来识别软骨藻酸。当样品中含有软骨藻酸时，样品中的软骨藻酸与软骨藻酸酶结合物竞争结合溶液中的软骨藻酸抗体。软骨藻酸抗体与包被在微孔板上的羊抗鼠二抗结合。经过一步洗涤加入底物溶液，产生有色反应。产生的绿色的颜色深度与样品中软骨藻酸的含量成反比。加入反应停止液后使颜色由蓝色转变为黄色。用酶标仪在450nm处测定吸光度值。通过绘制标准曲线来计算样品中软骨藻酸的含量。

5. 软骨藻酸试剂盒的局限性和可能的干扰

对在水样中经常出现的多种有机物和无机物已近作过检测对此试剂盒并无干扰。由于化合物的易变质性由基质反应引起的干扰是不可能完全避免的。操作不当也可能导致检测结果错误，比如：试剂盒保存条件不对、错误的加液顺序、试剂的量没有加准确、孵育的时间太长或太短、孵育的温度太高或太低。与其它检测方法一样对阳性结果要求通过其它传统的方法来验证。

6．软骨藻酸测定的重要性

软骨藻酸及其衍生物是一类海藻产生的水溶性毒素，主要是大亚湾拟菱形藻等微藻类生物。大亚湾拟菱形藻水华会导致贝类等滤食性生物体内软骨藻酸的富集。

ASP可以引起剂量依赖型的腹泻、恶心、呕吐症状。FDA对ASP的限量是20ppm。欧洲是20mgDA/kg。

这个试剂盒可以检测40个样品（做两个重复）。需要少量的样品，检测时间少于2小时。

A．试剂盒组成：

1、包被二抗的微孔板（羊抗鼠）

2、标准（5种）0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ng/ml

3、1瓶对照（1ml）浓度3.5 ng/ml

4、软骨藻酸抗体溶液（鼠抗软骨藻酸）6ml

5、软骨藻酸酶标记物6ml

6、样品稀释液（25ml）用于稀释样品

7、5x 浓缩洗液100ml

8、显色液（底物）TMB,16ml

9、终止液12ml