Western Blot 服务

 蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot，采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜或者PVDF膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
 

实验流程：

1、蛋白质抽提；

2、蛋白质定量：

3、变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE）；

4、转膜；

5、膜的封闭和抗体孵育；

6、化学发光法检测，经X光胶片曝光显影；

7、灰度值分析；

8、实验报告整理。

客户提供：
      1、样本、一抗、阴性、阳性对照和相关文献资料（一抗可由红土生物代购）；
      2、样品要求：组织样品100mg以上、细胞1×10^7以上，新鲜或冷冻保存。

红土生物提供：

实验所需的试剂（包括Marker和二抗）、原始X光胶片、实验报告（包括灰度值分析）