测定圆二色谱的样品前处理

测定圆二色谱的样品前处理-详情圆二色谱即圆二色光谱，是一项依据光学活性分子的圆二色性（circular dichroism，CD）发展而来的光谱分析技术。光学活性分子具有不对称空间结构，当平面偏振光经过光活性物质时，其对左、右圆偏振光的吸收度不同，导致左、右圆偏振光变成椭圆偏振光，常用于解析这些分子的二级和三级构象。大多数具有活性的生物大分子由于其不对称的空间结构都具有光学活性，均可作为圆二色谱研究的对象，如典型的蛋

测蛋白质的液质可以测代谢组吗

测蛋白质的液质可以测代谢组吗-详情液质即液相色谱串联色谱技术（LC-MS），不仅可以用于分析代谢组，而且是代谢组学分析的经典技术。利用质谱技术分析代谢物与分析蛋白质的原理一样，都需要利用离子源将各组分电离成带电离子，经电场加速后形成离子束，进入质量分析器进行检测，得到各离子关于质荷比的质谱图，从而确定其分子质量实现定性鉴定，再根据离子峰强度进行相对或jué对定量分析。除液相色谱外，气相色谱和核磁共振也可用

不同物种蛋白质混合物质谱

不同物种蛋白质混合物质谱-详情基于质谱的技术是当前蛋白质组学研究的重要技术，可对单一蛋白质样品以及复杂混合蛋白样品进行定性和定量分析。蛋白混合物质谱分析中各组分的分离是重要的一步，通常需要结合液相色谱技术对各组分进行分离，再对各蛋白组分进行质谱检测。蛋白质质谱全谱分析旨在尽可能多的识别的混合蛋白样品中的蛋白质或肽段，也称Shot-gun鸟枪法，在蛋白混合物分析如完整组织或提取液中蛋白质分析中广泛运用。利用

氨基酸质谱

氨基酸质谱-详情氨基酸是蛋白质的基本组成单位，不同种类和数量的氨基酸通过不同的排列方式组成了不同种类的功能多样的蛋白质。除了作为蛋白质的基本组成单位之外，游离的氨基酸以及氨基酸衍生物也对维持机体的稳态和平衡至关重要，在调节机体生长与免疫方面有着重要作用。研究表明，异常的氨基酸水平还会引起一些疾病。此外，氨基酸还可作为保健品和生物制药的原料。不管是进行蛋白质氨基酸组成测定还是在氨基酸保健品或生物药制

标记转移蛋白互作分析

标记转移蛋白互作分析-详情蛋白质通过相互结合形成蛋白质互作网络，参与生命过程的各个环节，如信号传递、基因表达调控、能量和物质代谢及细胞生长周期调控等。系统分析蛋白质的相互作用有助于了解特殊生理状态下生物信号和能量物质代谢的反应机制以及蛋白之间的功能联系，对研究疾病分子机制、发现新药靶点都有重要意义。常见的蛋白质相互作用分析方法主要包括Pull-down、GST Pull-down、IP、Co-IP、交联法以及标记转移法等。蛋白

标记质谱

标记质谱-详情质谱是蛋白质组学的重要研究工具，通过测定蛋白肽段离子的质荷比（m/z）得到肽质量图谱，利用蛋白质数据库进行检索可以对其进行定性鉴定。另外，根据蛋白肽段的离子峰强度可以计算其相对含量，结合内标肽可实现jué对定量。基于质谱的蛋白质组定量方法有很多，根据是否引入同位素，可以将其分为基于同位素的标记质谱和非标记质谱定量技术（Label Free）。基于同位素标记的质谱技术将水解得到的蛋白质多肽利用同位素试

变性质谱分子量与非变性质谱分子量

变性质谱分子量与非变性质谱分子量-详情质谱技术通过测定待测物的质量电荷比（m/z）从而实现分子质量的鉴定，其优良的分辨率、灵敏度以及准确性使其在各种化合物如蛋白质的分子质量分析中广泛运用。通常所用的分析蛋白质分子量的质谱技术是一种变性质谱技术，变性质谱会破坏二硫键等蛋白质空间结构，当需要对含有非共价键的蛋白分析时，为了避免非共价结合被强烈的变性条件所破坏，则需在非变性的条件下进行研究。变性质谱即通过酶

比较蛋白质组学和定向蛋白组学有何优势

比较蛋白质组学和定向蛋白组学有何优势-详情比较蛋白质组学又称差异蛋白质组学，主要是通过比较不同条件下样本的蛋白差异表达，寻找表达水平存在差异的蛋白质，从而揭示机体响应外界环境变化或者自身生长调节的本质，解释生理和病理机制，更好的认识机体生命活动规律。比较蛋白质组学建立在样本所表达的全部蛋白质的分析上，需要对全部蛋白进行无差别分析，尽可能多的定性定量鉴定样品中包含的蛋白质，在此基础上再进行差异蛋白筛

比较蛋白质组

比较蛋白质组-详情比较蛋白质组又称差异蛋白质组，是指两个样本间存在表达差异的蛋白质组。比较蛋白组学（comparative proteomics）即差异蛋白质组学旨在寻找和鉴定不同条件或状态下（如不同的外界刺激、不同的生长时期等）实验组和对照组样品存在差异表达的蛋白质组。蛋白质作为生命活动的物质承担者调节各种生理活动，其在机体内的种类和含量并不是一成不变的，而是处于动态变化中的，以适应生命体的各种生长变化。对这类蛋白质

氨基酸的分析与测定

氨基酸的分析与测定-详情对氨基酸进行分析测定主要包括对氨基酸种类和含量进行鉴定，可用于蛋白质、多肽以及蛋白类药物样品的氨基酸组成分析，评估蛋白质水平（即当蛋白质水解时）或鉴定蛋白质，作为肽质量指纹图谱或MS/MS测序的补充方法。目前氨基酸分析的方法主要包括离子交换色谱法（IEC）、高效液相色谱法（HPLC）以及离子色谱法（IC）等。这三种方法都包括分离-衍生-检测的步骤：IEC通过阳离子交换柱分离，柱后茚三酮衍生，利

氨基酸代谢组学

氨基酸代谢组学-详情氨基酸是生物大分子蛋白质的基本组成单位，由一个中心碳原子、H原子、羧基（-COOH）、氨基（-NH2）和可变的R基组成。近年来发现氨基酸不仅是细胞信号分子，也是基因表达和蛋白质磷酸化级联的调节因子。此外，氨基酸也是合成各种具有重要生物学功能的激素和低分子量含氮物质的关键前体，即这些功能的实现需要一定生理浓度的氨基酸及其代谢物。除了作为蛋白质和多肽的组成部分之外，一些氨基酸还调节生长、繁殖和

western blot技术

western blot技术-详情蛋白印迹（Western Blot，WB）也称免疫印迹，是一种基于抗体的蛋白质分析技术。利用抗体-抗原的特异性相互作用可以在复杂的蛋白质混合物中识别感兴趣蛋白（目标蛋白质），以实现感兴趣蛋白的定性和半定量分析，在蛋白质表达水平、抗体活性、蛋白质相互作用以及蛋白质翻译后修饰分析中广泛应用。WB主要包括以下步骤：（1）样品分离：利用SDS-PAGE分离蛋白混合物；（2）转膜：将蛋白条带从凝胶转移到固相载体—

WB检测磷酸化蛋白

WB检测磷酸化蛋白-详情蛋白印迹（Western Blot，WB）是基于免疫学原理的一种蛋白质分析技术，常用于检测组织匀浆提取物中特定蛋白质的存在、大小、含量以及相互作用等。WB已广泛用于蛋白质-DNA相互作用、蛋白质-蛋白质相互作用以及蛋白质翻译后修饰等分析。WB同样可以检测特定样品中磷酸化蛋白的存在、含量以及大小等，只是需要选择能特异识别磷酸化蛋白的一抗。其基本原理是通过一级抗体识别并结合经电泳分离并转移到PV膜上的磷酸

wb检测蛋白互作

wb检测蛋白互作-详情蛋白质控制着细胞中的所有生物系统，虽然许多蛋白质独立地执行它们的功能，但是jué大多数蛋白质通过与其他蛋白质相互作用来执行各种各样的生物活动。因此，研究蛋白质相互作用对于理解蛋白质功能和细胞生物学至关重要。目前，常用的蛋白质相互作用研究技术主要包括免疫共沉淀（Co-IP）、（GST）Pull-down、交联法、标记转移法、蛋白印迹（Western Blot）以及Far-Western Blot等。蛋白印迹（Western Blot，WB）

wb蛋白定量

wb蛋白定量-详情"蛋白质印迹（Western blotting，WB）是细胞和分子生物学中的一项重要技术。通过使用蛋白质印迹，研究人员能够从细胞中提取的复杂蛋白质混合物中鉴定出特定的蛋白质。该技术使用通过三个步骤来完成这一任务：（1）按大小进行蛋白分离，（2）将蛋白转移到固体支持物上，（3）使用合适的一级和二级抗体标记靶蛋白进行可视化。WB通常用于分离和鉴定蛋白质的研究，也可用于蛋白含量的鉴定。在这种技术中，根据蛋白质分

swath-ms

swath-ms-详情"SWATH-MS是一个新兴的用于非标记定量的蛋白质组学平台，该平台基于数据非依赖型采集（DIA）原理，用于同时进行蛋白质鉴定和定量。不同于传统的基于数据依赖型模式的质谱技术如Shotgun和SRM等，SWATH-MS从某种意义上说完整地记录了蛋白样品中任何可检测的前体离子的所有碎片信息，集Shotgun（高通量）和SRM（高准确性和重复性）的优点于一身，正在成为一种将深度蛋白质组覆盖能力与定量一致性和准确性相结合的技术。S

SRM、MRM与PRM的区别

SRM、MRM与PRM的区别-详情"MRM（Multiple Reaction Monitoring）多重反应监测也称SRM（selected reaction monitoring）选定反应监测，与PRM（Parallel Reaction Monitoring）平行反应监测技术是靶向定量蛋白质组学研究中两种不同的质谱数据采集模式，PRM是在MRM/SRM的基础上发展而来的，两者主要存在以下几点不同之处：（1）MRM/SRM一次监测每个前体离子/产物离子的转变，而PRM以高分辨率和高质量精度分

SILAC最多可以标记多少样品

SILAC最多可以标记多少样品-详情"SILAC（Stable isotope labeling using amino acids in cell culture）细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一种基于质谱的标记定量蛋白质组学方法，使用非放射性同位素标记来检测样品中蛋白质丰度的差异。SILAC通过正常的代谢过程标记细胞蛋白质组，利用含同位素标记的氨基酸培养基培养细胞，通过细胞正常的新陈代谢使所有新合成的蛋白质带上非放射性、稳定的含同位素的氨基酸，zuì后利用液相色谱

SILAC技术和免疫共沉淀法结合质谱联用技术

SILAC技术和免疫共沉淀法结合质谱联用技术-详情"免疫共沉淀（Co-IP）是基于免疫学原理研究蛋白质相互作用的经典方法，通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白，从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用，并可通过质谱技术来鉴定新的相互作用蛋白质。SILAC（Stable isotope labeling using amino acids in cell culture）细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一种基于同位素标记的蛋白定量技术。SILAC方法使用体内新

shotgun和TMT

shotgun和TMT-详情"Shotgun鸟枪法蛋白质组学是一种自下而上的蛋白质组学分析策略，这种分析策略将完整蛋白质酶解消化为小分子肽段，通过液相色谱进行分离后进行串联质谱分析，根据质谱数据信息如肽段母离子的质荷比（m/z）等结合生物信息学软件进行数据分析，以实现蛋白/多肽序列以及含量分析等。TMT串联质量标签是一种典型的Shotgun基于鸟枪法的蛋白质标记定量技术。同位素标记包括用合成的含有轻或重同位素的试剂化学修饰靶肽，