肽质量指纹图谱分析

肽质量指纹图谱分析-详情"肽质量指纹图谱（PMF），也称为蛋白质指纹，是一种开发于1933年的蛋白质高通量分析方法，用于鉴定蛋白质。内切蛋白酶shǒu先将未知的靶蛋白裂解为较小的肽段，这些肽的jué对质量可以使用质谱仪进行准确测量，并且还可以获得未知蛋白质的肽峰列表。使用生物信息学方法将峰列表与蛋白质数据库中的理论肽峰列表进行比较。理论数据库将所有有机体的所有已知基因组翻译成蛋白质，理论上将蛋白质水解成小肽，并

蛋白组学数据如何分析

蛋白组学数据如何分析-详情"蛋白质组学分析中zuì重要也是zuì关键的一步就是对海量的数据进行相关的生物信息学分析，将数据可视化，获取我们研究需要的蛋白质的相关信息。那么蛋白组学数据分析又该从何做起呢？shǒu先，我们需要对获得的蛋白质组学数据进行快速的可视化分析，如主成分分析、相关性分析、火山图分析、韦恩图分析、热图分析以及聚类分析等，先对数据的整体情况进行大致了解，如样品均一性、样品间差异性以及变化趋

SEC检测

SEC检测-详情"SEC尺寸排阻或凝胶色谱是一种特别适用于高分子量物质的分离分析技术，其使用多孔材料作为固定相，液体作为流动相，多孔材料的孔径约为50-3000Ǻ，与许多分子的大小相似。在这种技术中，分离是根据溶质分子的大小进行的，溶质分子根据多孔材料孔径的大小穿透球形材料。小分子比大分子渗透得更快，大分子经常被排除在小孔之外，这导致分子通过色谱柱的速度不同从而实现不同分子的分离。SEC检测是zuì被大众认可的测定大

分子量测定

分子量测定-详情"分子量是有机化合物基本的理化性质参数，一般指相对分子质量，是化合物化学式中各个原子的相对原子质量之和。分子量正确与否往往代表着所测定的有机化合物或生物大分子的结构正确与否。分子量是多肽、蛋白质等鉴定中shǒu要的参数，也是基因工程产品报批的重要数据之一。分子量测定蛋白质分子量测定的方法有很多，目前常用的主要包括粘度法、凝胶渗透色谱法、SDS-PAGE法、光散射法，以及质谱法等。其中质谱法主要

多肽质谱

多肽质谱-详情"多肽质谱就是利用质谱技术对多肽进行鉴定分析。多肽质谱分析的原理与蛋白质一样，都是通过串联质谱进行定性或定量鉴定。经色谱分离的多肽分子通过离子源进行离子化后，利用质谱仪进行一级和二级质谱检测，根据MS1和MS2数据，如多肽离子质荷比、质谱图等结合生物信息学分析，获取多肽的氨基酸序列信息或翻译后修饰信息，以实现多肽的鉴定和表征。百泰派克生物科技使用Thermo公司zuì新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱

shotgun策略蛋白质分析

shotgun策略蛋白质分析-详情"Shotgun鸟枪法蛋白质组学分析是指利用高效液相色谱和质谱联用技术，使用自下而上的蛋白质组学策略鉴定复杂混合物中的蛋白质。鸟枪法蛋白质组学zuì常见分析策略是先酶解消化混合物中的蛋白质，然后用液相色谱（LC）法分离酶解产生的多肽，被分离的肽段在质谱仪中解离成带电荷的离子，通过串联质谱分析获得相应的质谱数据，利用生物信息学软件结合相应蛋白质数据库质谱数据进行分析，从而实现蛋白质的定

蛋白质复合物，蛋白质与小分子复合物分子量测定

蛋白质复合物，蛋白质与小分子复合物分子量测定-详情"质谱法鉴定蛋白质分子量对样品的消耗很少，且具有更高的灵敏度、分辨率和准确度，有利于对复杂混合物样品的分析。目前广泛用于蛋白质鉴定的质谱分析主要有两种类型的质谱：一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量，MALDI离子源产生的离子多带单电荷，质谱图中的峰与样品各组分质量数是一一对应的，不用额外去卷积即可根据质谱图计算得出样品的分子量；另一种是使用ESI-MS高分辨率

多肽链氨基酸序列分析

多肽链氨基酸序列分析-详情"多肽是指由三个及以上氨基酸脱水缩合形成的小分子化合物，多肽与蛋白质之间没有明显界限，一般将氨基酸数量小于50或分子质量小于30kDa的称为多肽。蛋白质进行序列分析需要先将其酶解成多肽片段再进行后续操作，因此多肽氨基酸序列分析的方法和原理与蛋白质大同小异，蛋白质测序方法同样适用于多肽，如N端测序、C端测序、从头测序、肽质量图谱测序和基于质谱的序列分析等。百泰派克生物科技使用Thermo公

shotgun和TMT

shotgun和TMT-详情"Shotgun鸟枪法蛋白质组学是一种自下而上的蛋白质组学分析策略，这种分析策略将完整蛋白质酶解消化为小分子肽段，通过液相色谱进行分离后进行串联质谱分析，根据质谱数据信息如肽段母离子的质荷比（m/z）等结合生物信息学软件进行数据分析，以实现蛋白/多肽序列以及含量分析等。TMT串联质量标签是一种典型的Shotgun基于鸟枪法的蛋白质标记定量技术。同位素标记包括用合成的含有轻或重同位素的试剂化学修饰靶肽，

分泌蛋白的组学检测

分泌蛋白的组学检测-详情"蛋白质是生物体细胞功能的直接执行者，也是保证生命过程正常进行的重要物质。蛋白质在核糖体上合成，经内质网和高尔基体进行加工，成为成熟的、有生物学功能的活性蛋白。蛋白质都是在细胞内合成，但是细胞外也有各种蛋白质，执行不同的生物学功能。所以，蛋白质在细胞内合成后，会被转运到不同的部位发挥其特定的作用。分泌蛋白就是在细胞内合成后，分泌到胞外起作用的蛋白质，如各种消化酶、激素、淋巴因

SILAC技术和免疫共沉淀法结合质谱联用技术

SILAC技术和免疫共沉淀法结合质谱联用技术-详情"免疫共沉淀（Co-IP）是基于免疫学原理研究蛋白质相互作用的经典方法，通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白，从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用，并可通过质谱技术来鉴定新的相互作用蛋白质。SILAC（Stable isotope labeling using amino acids in cell culture）细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一种基于同位素标记的蛋白定量技术。SILAC方法使用体内新

高通量测序

高通量测序-详情"高通量测序技术，又称为二代测序技术（Next Generation Sequencing, NGS）是在一代测序技术上发展而来的新一代测序技术。高通量测序技术克服了一代测序技术通量低、成本高的缺点，使同时分析几十万到几百万条序列成为现实，在大幅度提高通量的同时，保证了测序结果的准确性，降低了测序成本。高通量测序技术的问世使得我们能快速、细致、全面、深入的分析一个物种的基因组和转录组序列，揭开这些遗传物质的神秘面

SILAC最多可以标记多少样品

SILAC最多可以标记多少样品-详情"SILAC（Stable isotope labeling using amino acids in cell culture）细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一种基于质谱的标记定量蛋白质组学方法，使用非放射性同位素标记来检测样品中蛋白质丰度的差异。SILAC通过正常的代谢过程标记细胞蛋白质组，利用含同位素标记的氨基酸培养基培养细胞，通过细胞正常的新陈代谢使所有新合成的蛋白质带上非放射性、稳定的含同位素的氨基酸，zuì后利用液相色谱

iTRAQ

iTRAQ-详情"iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）即同位素标记相对和绝对定量技术，是由AB SCIEX公司研发的一种基于标签的蛋白质定量技术。iTRAQ技术通过同位素标记来实现蛋白质定量研究，其基本原理为：将水解得到的蛋白质多肽N末端或赖氨酸侧链基团用同位素试剂标签标记，再将该混合物进行高精度串联质谱分析，根据信号峰强度等质谱信息实现对样品蛋白的定量和定性分析。iTRAQ含有8种不同的试剂标签，

SRM、MRM与PRM的区别

SRM、MRM与PRM的区别-详情"MRM（Multiple Reaction Monitoring）多重反应监测也称SRM（selected reaction monitoring）选定反应监测，与PRM（Parallel Reaction Monitoring）平行反应监测技术是靶向定量蛋白质组学研究中两种不同的质谱数据采集模式，PRM是在MRM/SRM的基础上发展而来的，两者主要存在以下几点不同之处：（1）MRM/SRM一次监测每个前体离子/产物离子的转变，而PRM以高分辨率和高质量精度分

swath-ms

swath-ms-详情"SWATH-MS是一个新兴的用于非标记定量的蛋白质组学平台，该平台基于数据非依赖型采集（DIA）原理，用于同时进行蛋白质鉴定和定量。不同于传统的基于数据依赖型模式的质谱技术如Shotgun和SRM等，SWATH-MS从某种意义上说完整地记录了蛋白样品中任何可检测的前体离子的所有碎片信息，集Shotgun（高通量）和SRM（高准确性和重复性）的优点于一身，正在成为一种将深度蛋白质组覆盖能力与定量一致性和准确性相结合的技术。S

非定量蛋白质组学

非定量蛋白质组学-详情"定量蛋白组学技术根据是否使用标签标记分为标记和非标记两种策略，即标记定量蛋白质组学和非标记定量蛋白质组学。目前还没有非定量蛋白质组学这一说法，可能刚入门的蛋白质组学研究者对这些专业术语不够了解，误把非标记定量蛋白质组学当成非定量蛋白质组学。非标记定量蛋白质组学技术又称为Label Free蛋白质定量技术，其一般的分析流程为将未标记的蛋白样品进行酶解、消化为小分子肽段，再利用串联质谱技术

wb蛋白定量

wb蛋白定量-详情"蛋白质印迹（Western blotting，WB）是细胞和分子生物学中的一项重要技术。通过使用蛋白质印迹，研究人员能够从细胞中提取的复杂蛋白质混合物中鉴定出特定的蛋白质。该技术使用通过三个步骤来完成这一任务：（1）按大小进行蛋白分离，（2）将蛋白转移到固体支持物上，（3）使用合适的一级和二级抗体标记靶蛋白进行可视化。WB通常用于分离和鉴定蛋白质的研究，也可用于蛋白含量的鉴定。在这种技术中，根据蛋白质分

谷氨酸蛋白酶 蛋白质质谱分析

谷氨酸蛋白酶 蛋白质质谱分析-详情"蛋白质质谱分析技术可用于蛋白质定性和定量鉴定、蛋白质序列分析以及蛋白质结构预测等。质谱仪只能对离子化形式的物质进行检测，在进行蛋白质质谱分析前，需要将蛋白质酶解为小分子肽段，再利用离子源电离为肽段离子，zuì后利用质谱仪进行检测，所以蛋白酶解是样品制备的关键步骤。蛋白质质谱分析中常用的蛋白水解酶主要有胰蛋白酶（Trypsin）、谷氨酸蛋白酶（Glu-C）、糜蛋白酶（Chymotrypsin

wb检测蛋白互作

wb检测蛋白互作-详情蛋白质控制着细胞中的所有生物系统，虽然许多蛋白质独立地执行它们的功能，但是jué大多数蛋白质通过与其他蛋白质相互作用来执行各种各样的生物活动。因此，研究蛋白质相互作用对于理解蛋白质功能和细胞生物学至关重要。目前，常用的蛋白质相互作用研究技术主要包括免疫共沉淀（Co-IP）、（GST）Pull-down、交联法、标记转移法、蛋白印迹（Western Blot）以及Far-Western Blot等。蛋白印迹（Western Blot，WB）