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PTM蛋白分析
PTM蛋白分析-详情PTM蛋白质翻译后修饰参与大多数细胞生理过程,包括蛋白质结构和完整性的维持、代谢和防御过程的调节,以及细胞识别事件和形态变化等。 PTM蛋白分析是阐明细胞事件复杂过程如细胞分裂、生长和分化等的基础。蛋白质翻译后修饰的多样性以及复杂性给PTMs的分析带来了许多挑战,传统上,可通过埃德曼降解、氨基酸分析、同位素标记或免疫化学等技术来鉴定PTMs。近年来,质谱被证明在PTM发现中jí其有用。蛋白质中共价修
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2023-09-11 09:30
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自上而下、自中而下和自下而上分析法比较
自上而下、自中而下和自下而上分析法比较-详情自下而上蛋白质组学策略是一种将蛋白质/酶的大片段混合物分解成小片段肽以进行分析的传统蛋白质组学分析策略。广泛应用于蛋白质组学研究的质谱技术。自中而下蛋白质组学策略使用不同的酶来获得较长的肽。它可以分析和识别较长的肽链上同时发生的几种翻译后修饰。与自下而上的方法相比,它可以分析的肽的长度范围更大。自上而下的蛋白质组学策略不需要酶水解的过程,而是直接分析完整的
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PTM位点
PTM位点-详情蛋白质翻译后修饰(PTM)是指蛋白质特定氨基酸残基共价结合官能基团的过程,其通过改变蛋白质的物理和化学性质、折叠、构象、稳定性和活性等从而修饰蛋白质的功能,在各种细胞过程中起着重要作用。蛋白质所结合的官能基团的类型以及发生修饰的氨基酸位点即PTM位点密切影响其生物学功能,大多数蛋白质类药物通过某种形式的PTM传递其治疗效果,分析鉴定蛋白类药物的PTM位点有助于我们理解其发挥药效的生理机制,也为其体
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蛋白质组学在微生物研究中的应用
蛋白质组学在微生物研究中的应用-详情细菌、放线菌和真菌等微生物在我们的星球上无处不在,它们广泛分布在土壤、水、人体等环境中。微生物及其活动对生物地球化学循环和所有生物系统都具有重要意义。在微生物的研究中有许多出色的成果:1. 地球化学循环研究;2. 帮助临床医生确定某种疾病或疾病发展的阶段;3. 确定可用于抗微生物药物开发的毒力因子;4. 使研究人员能够评估土壤、水和其他环境的污染状况;5. 帮助研究人员增加牲畜
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pull down蛋白质谱
pull down蛋白质谱-详情Pull Down是一种利用体外亲和纯化方法确定两种或多种蛋白质之间的物理相互作用的方法,既可用于确认由其他研究技术(例如,共免疫沉淀)预测的蛋白质-蛋白质相互作用的存在,也可作为鉴定以前未知的蛋白质-蛋白质相互作用的初始筛选测定法。理解蛋白质结构和功能的第yī步是确定哪些蛋白质相互作用,从而确定相关的细胞生理途径。Pull Down已经成为通过对感兴趣的蛋白质-蛋白质相互作用研究细胞途径的宝贵工
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蛋白质组学在药物发现中的应用
蛋白质组学在药物发现中的应用-详情蛋白质组学是从整体的角度分析蛋白质组分的动态变化,包括表达水平和修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用和联系,揭示蛋白质的功能和细胞生命规律,研究细胞内所有蛋白质及其行为的学科。蛋白质组学的概念被应用于药物研究领域,从而发展了药物蛋白质组学。该领域包括:发现所有可能的药物靶点和这些靶点的所有可能的化合物;药物作用机制和毒理学研究;药物筛选。还可以根据蛋白质谱对患者进行
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非靶向代谢组学和靶向代谢组学的特点和区别
非靶向代谢组学和靶向代谢组学的特点和区别-详情"代谢组学可以分为非靶向代谢组学和靶向代谢组学。非靶向代谢组学可以全面、系统地分析源自生物体的所有代谢产物,是一种可以发现新生物标志物的无偏代谢组学分析。靶向代谢组学是对特定代谢产物的研究和分析。两者都有各自的优点和缺点,并且经常结合使用以发现和准确测定差异代谢物的含量,对后续代谢分子标记物的深入研究和分析。非靶向代谢组学和靶向代谢组学参与食品鉴定、疾病
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pull-down实验和免疫共沉淀足够证明分子互作吗
pull-down实验和免疫共沉淀足够证明分子互作吗-详情"Pull-down实验和免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)都是研究蛋白质分子相互作用的常用方法。根据二者的实验原理可知,理论上是可以证明蛋白质与蛋白质之间的相互作用的。但是,根据两种技术的局限性也不难排除以下情况:Co-IP可能无法检测到蛋白质之间的低亲和力或短暂的相互作用;再者检测结果不能确定交互作用是直接的还是间接的,因为不能排除其他蛋白在中间起桥梁
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多肽测序
多肽测序-详情"已经被鉴定识别的天然肽多达数千种,它们在人类的生理过程中扮演着重要的角色,包括作为激素、神经递质、生长因子、离子通道配体或抗感染等等。多肽类药物被认为具有高选择性和有效性,同时,具有相对安全和良好的耐受性。因此,人们对多肽类药物在药物研究和开发(RD)方面的兴趣越来越大,数百种多肽类药物正在进行临床试验评估。肽和蛋白质都是由人体的基本组成部分-氨基酸组成,并通过肽键结合在一起。他们的区别
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五种常见质谱仪
五种常见质谱仪-详情"质谱仪是一种产生离子并根据质荷比(m/z)分离离子的仪器。质谱仪的组件包括离子源、质量分析仪器、检测器和真空系统。目前已经开发出各种质谱仪来满足不同的需求。TSQ Quantum Access MAX三重四jí杆质谱仪Thermo Scientific TSQ Quantum Access MAX 三重四jí杆质谱仪TSQ Quantum Access MAX三重四jí杆质谱仪由Thermo Scientific公司推出,通常配备有液相色谱(LC)。该质谱仪配备有质量数高达
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SDS-PAGE分析
SDS-PAGE分析-详情"SDS-PAGE(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis)十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳是Ulrich K. Laemmli开发的一种不连续电泳系统,常用于分离和鉴定分子量在250 kDa之内的蛋白质混合物。十二烷基硫酸钠(SDS,也称为十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的联合使用可以消除结构和电荷的影响,使蛋白质仅根据其分子量的差异进行分离,常用于复杂蛋白质混合物的高分辨率分离实验。SD
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4D-DIA蛋白质组学
4D-DIA蛋白质组学-详情"传统的蛋白质组学是基于肽段保留时间、离子强度和离子质荷比这三个维度对蛋白组进行检测分析,4D蛋白质组学在传统的三维分离基础上增加了离子淌度这一维度,提高了质谱仪器的检测性能和蛋白质组学的分析标准。4D蛋白质组学基于timsTOF Pro以及双TIMS和PASEF技术,大幅度的提高了数据采集速度、检测灵敏度和分辨率。DIA(Data independent acquisition)是一种数据非依赖采集模式。相较于3D蛋白组学采用的DDA
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sds-page测定蛋白质纯度
sds-page测定蛋白质纯度-详情"SDS-PAGE是一种根据分子量分离蛋白质的凝胶电泳分析技术。当蛋白质通过凝胶基质电泳分离时,较小分子量的蛋白质受到来自凝胶基质的阻力更小,电泳时迁移速度更快。影响蛋白质在凝胶基质中的迁移速率的其他因素还包括蛋白质的结构和电荷,在SDS-PAGE中,十二烷基硫酸钠(SDS,又称十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的使用很大程度上消除了结构和电荷的影响,蛋白质的分离完全基于多肽链的长度。蛋白质
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IP质谱
IP质谱-详情"IP(Immunoprecipitation)即免疫沉淀,是用于研究蛋白相互作用的一种分析技术。IP免疫沉淀基于抗体与抗原特异性结合的原理,利用已知的蛋白作为抗体,特异性识别并结合混合体系中的抗原蛋白,该技术广泛用于验证两种已知的蛋白相互作用或寻找未知的蛋白相互作用。IP质谱分析则是将免疫沉淀得到的蛋白利用质谱技术进行后续的定性定量检测,就可以明确两种相互作用的蛋白的种类及定量信息。目前IP质谱(IP-MS)已广泛用
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SDS-PAGE电泳鉴定抗体纯度
SDS-PAGE电泳鉴定抗体纯度-详情"抗体是免疫系统响应进入体内的外来分子而产生的宿主蛋白质。这些外来分子被称为抗原,它们被免疫系统的分子识别并产生能够结合特定抗原的抗体。抗体由B淋巴细胞产生,并在血液和淋巴液中循环,特异性结合并清除外来抗原。抗体可制造成探针,用于在各种研究和诊断应用中检测感兴趣的分子,一些新型的蛋白类抗体药物便由此产生。抗体生产是指产生可用的特异性抗体的整个过程,包括免疫原制备、免疫、
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蛋白质一级结构的测定
蛋白质一级结构的测定-详情"蛋白质的一级结构是蛋白质生物功能的基础,测定其一级结构有助于研究蛋白质的功能。百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白质一级结构检测服务。蛋白质的结构蛋白质结构是在氨基酸链分子中的原子的三维排列。为了能够执行其生物学功能,蛋白质会折叠成一个或多个特定的空间构象。蛋白质结构有四个不同的水平:一级结构,指蛋白质多肽链中氨基酸的序列,包括二硫键的位置;二级结构,指实际多肽主链上的高度
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蛋白质分离纯化及鉴定综合实验
蛋白质分离纯化及鉴定综合实验-详情"在蛋白组学研究中,如果要对某一混合体系中的蛋白质进行定性或定量分析,就需要先对蛋白组分进行分离、纯化,然后再进行后续的鉴定分析。这一系列实验环环相扣,每一步都至关重要,直接影响实验结果的准确性。理想的蛋白质分离技术shǒu先要有超高的分辨率,能够将成千上万不同类型的蛋白质包括它们修饰物进行有效的分离。目前常用的蛋白质分离技术包括一维/二维凝胶电泳技术、双向电泳技术以及
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sds-page鉴定目的蛋白质
sds-page鉴定目的蛋白质-详情"SDS-PAGE十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种zuì常用的高分辨率分析分离电泳技术。电泳通过施加电场使带电分子在基质中移动,在这种技术中,影响带电分子迁移率的因素包括其本身的相对分子量、电荷以及结构等。SDS-PAGE用阴离子去污剂对待检测样品进行初始变性,赋予所有待测分子与其分子量成比例的负电荷,再结合聚丙烯酰胺凝胶可以消除结构以及电荷的影响,使待测物质仅根据其分子量的差异进行
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非变性质谱
非变性质谱-详情"非变性质谱是相对于变性质谱而言,通常说的质谱技术一般是指变性质谱。变性质谱与非变性质谱在检测对象和zuì终目的两个方面有很大的区别,传统的变性质谱分析需要将蛋白样品进行酶解,再将小分子肽段进行质谱分析,蛋白质的天然结构、共价和非共价结合遭到破坏;而非变性质谱不需要进行样品前处理,可以直接检测完整的蛋白复合体。再者,利用变性质谱进行蛋白分析时主要是对蛋白质进行定性和定量鉴定;非变性质谱
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SDS-PAGe可以跑出蛋白纯度吗
SDS-PAGe可以跑出蛋白纯度吗-详情"SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳是一种基于分子质量的高分辨率大分子化合物电泳分离技术,被测物由于相对分子质量不同导致其在凝胶中的迁移速率不同而分离开来。根据SDS-PAGE电泳的原理可知,SDS-PAGE可以间接判断蛋白质样品的纯度,将未知纯度的蛋白质样品进行SDS-PAGE凝胶电泳,观察电泳结束后产生的蛋白条带,若凝胶上有且仅有一个蛋白条带,则说明该蛋白样品只含有一种蛋白质;反之,若观察到不止一个
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