基于质谱的序列分析

基于质谱的蛋白质、抗体、多肽等样品的序列分析，是对样品氨基酸序列的分析。质谱测序即指基于质谱对样品一级结构氨基酸序列的测定。在进入质谱序列分析之前，我们先对几个定义进行简单的介绍。氨基酸是含有胺（-NH2）和羧基（-COOH）官能团以及每个氨基酸特有的侧链（R基团）的有机化合物。肽是由肽键连接的两个至五十个氨基酸组成的短链。多肽是更长、连续、不分支的肽链，最多可包含约五十个氨基酸的较长的肽链。包含五十个以上

基于Edman降解的蛋白N端序列分析

表达纯化后的蛋白产物，特别是蛋白品的分析过程中，需要对蛋白的末端进行验证，以保证表达纯化产物的N端和C端序列准确。Edman降解法是蛋白的N端序列分析中非常成熟的方法之一，有着广泛的应用。百泰派克公司采用岛津公司Edman测序系统，为广大科研工作者和科研客户提供纯化后蛋白产物、抗体以及蛋白疫苗的N端测序服务。采用我们的测序系统，可以测定N端30个氨基酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统，可以测定N端的60-70个氨基酸

从头测序

蛋白分子在单克隆抗体药物，生物疫苗，诊断试剂盒研发等生物药物领域中扮演了关键的角色。准确测定蛋白质序列在研发商业单克隆抗体，疫苗，以及试剂盒等药物方面有着很重要的作用。百泰派克公司基于高分辨率质谱仪Obitrap Fusion Lumos，结合丰富的生物信息学分析经验，建立了全新一代蛋白从头测序和突变分析（De Novo Sequencing）平台，能够实现对单克隆抗体一级结构序列，蛋白质序列和突变进行快速准确的分析。从头测序从头测序

Far-Western Blot分析

Far-Western Blot是一种基于Western Blot技术的分子生物学方法，可用于检测体外蛋白质与蛋白质的相互作用，尤其是不需要目标蛋白质的天然结构的相互作用检测。Far-Western Blot技术的整体工作流程与Western Blot相似，只是Western Blot中探测目标蛋白质需要抗体，而Far-Western Blot分析中不需要抗体，而是使用经过纯化和标记的“诱饵”蛋白来探测和检测膜上的目标蛋白。在Western Blot和Far-Western Blot中，蛋白质都是通过SD

交联法蛋白相互作用分析

生理条件下，大多数蛋白质间相互作用持续时间很短，从而使得相互作用研究变得很困难。交联试剂为这一问题提供了解决方案，即在蛋白质相互作用时将它们共价交联在一起，捕获蛋白质-蛋白质复合物，冻结短暂微弱的相互作用，从而实现对短暂相互作用蛋白的分离和表征。交联过程在体内或体外都可以进行，使用体内还是体外交联取决于项目的需求。两者区别在于，蛋白质在体内交联过程中以天然状态交联，而对于体外交联，蛋白质可能会发生

蛋白质相互作用质谱分析

在过去的几十年中，以质谱(MS)为基础的蛋白质组学已经成为鉴定蛋白质-蛋白质相互作用分析(PPIs)的重要技术。蛋白质通过与其它蛋白质或化合物相互作用，形成大分子化合物，从而发挥生物学功能。对蛋白质相互作用的研究能够帮助我们更好的理解蛋白质。当通过IP, CO IP或GST pull-down等蛋白质相互作用分析手段，获得靶标蛋白后，通过质谱分析方法对该蛋白进行分析，鉴定及定量，能够对相互作用蛋白进行表征，进一步对蛋白质功能进行

GST pull-down蛋白相互作用分析

标准的pull-down分析需要带有重组亲和标签的纯化蛋白，该标签具有“诱饵”的功能，并固定在标签特异性亲和配体上。然后将另一种蛋白质或“猎物”蛋白质与“诱饵”蛋白质一起孵育。当这两种蛋白质发生物理相互作用时，“猎物”蛋白质将被“诱饵”蛋白质捕获。之后，取决于亲和配体，可以使用洗脱缓冲液洗脱相互作用的“猎物”蛋白。最后，“猎物”和“诱饵”蛋白都可以通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离，然后

CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析

免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）技术是一种通过使用能够与蛋白质结合的抗体从溶液中分离出特定蛋白质的技术，是抗原纯化和检测中使用最广泛的方法之一。通过添加不溶形式的抗体结合蛋白（例如与琼脂糖浆液或新近流行的磁珠缀合的蛋白A或Protein G）从溶液中去除抗体-蛋白复合物。免疫沉淀法使用抗原特异性抗体从复合抗原溶液中分离目标抗原，并使用聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE法分析复合蛋白混合物中存在的抗体反应性抗原的数量和

精确质量测定

精确质量测定可用于化学和生物化学包含的所有领域。它可用于鉴定复杂混合物中的未知化合物，从而简化这些组分的鉴定。测量的准确度是指测量得到的值与其实际真实值的符合程度。近年来，生物样品的质量测定受到越来越广泛的关注，同时，准确测定此类化合物的质量也遇到了新的挑战。通过各种仪器实现准确的质量测量，尤其是质谱技术的进步使通过质谱进行精确的质量测量应用更为广泛。精确质量测定百泰派克生物科技提供蛋白质、寡核苷

序列分析

蛋白质是由多个氨基酸经过脱水缩合连接在一起形成的。氨基酸是蛋白质的基本组成单元，其排列顺序即蛋白质的序列信息是蛋白质的一级结构。蛋白质的一级结构决定了蛋白质其它高级结构，并定义了蛋白质的功能。因此，对蛋白质进行序列分析有助于蛋白质的结构和功能的分析。序列分析蛋白质的序列分析技术主要可以分为质谱法和非质谱法。其中质谱法可以用于蛋白质的末端（N端或C端）测序，也可以用于蛋白质的全序列测定、从头测序和突变

蛋白质相互作用分析

蛋白相互作用是指两个及以上的蛋白质分子结合形成蛋白质复合体的一个过程。一般情况下蛋白质很难单独发挥作用，都是由多个蛋白质分子的相互协调共同实现复杂的细胞功能。因此专注于蛋白相互作用的研究更加利于探索疾病的发生发展、找寻特定的疾病预测治疗方法，并且在新药研发的研究方面提供新的思路。蛋白质互作分析的方法较多，百泰派克提供蛋白质互作分析服务，及后续基于液质联用技术（LC-MS/MS）对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白

双向电泳图像分析

二维凝胶电泳技术中要求最高，最重要的部分，是对得到的蛋白质图像进行分析，图像信息将被比较及自动化分析。比较二维凝胶图像以检测单个样品或不同群体之间蛋白质的定性和/或定量表达变化。二维凝胶的成像分析可以提供各种类型的信息，以检测新型、缺失或修饰的蛋白质，蛋白质斑点的定量，蛋白质斑点的pI和Mr值测定，酶解和质谱检测。蛋白质图像分析为了分析和比较复杂的二维图像，需要使用扫描仪或相机将凝胶图像信息转换为数字

2D Blue Native/SDS-PAGE复合物分析服务

在生物膜中，许多蛋白质以复合物形式组成。百泰派克生物科技可利用2D Blue Native/SDS-PAGE对这些蛋白质复合物的亚基进行全局分析。2D BN/SDS-PAGE分析中，样品通过蓝色native聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行一维分离，然后通过SDS-PAGE进行二维分离。2D Blue Native SDS-PAGE复合物分析服务蛋白质复合物在时间和空间的所有复杂层面上都可以组织并维持细胞和细胞器的功能，包括细胞发育和分裂、转录和翻译、呼吸作用和光合作用

蛋白质免疫印迹和电转移服务

电泳分离的蛋白质从凝胶基质转移或“印迹”到膜（通常是硝酸纤维素或PVDF）上，然后在膜表面进行基于抗体的后续检测，称为蛋白质免疫印迹（Western Blot或immunoblotting）。百泰派克生物科技提供蛋白质免疫印迹分析服务，蛋白质免疫印迹法通过高选择性和高敏感的抗体-抗原相互作用，可用于从复杂蛋白质混合物中检测特定的目标蛋白质，例如组织匀浆或细胞提取物等。所得数据可用于对目标蛋白质进行定性和半定量分析。电转移一般流

二维凝胶电泳服务

二维凝胶电泳（2-DE），即双向电泳，是一种功能强大且使用广泛的方法。二维凝胶电泳是等电聚焦和SDS-PAGE两种方法的结合，先将蛋白质在等电聚焦中通过等电点（pl）进行分离后，再通过SDS-PAGE进行二次分离，根据分子量解析蛋白质。二维凝胶电泳上的每个蛋白质斑点都可以通过高通量质谱法进行洗脱和鉴定。因此，二维凝胶电泳特别适用于比较不同组织、不同条件或对照样品与实验样品之间的蛋白质图谱。百泰派克二维凝胶电泳服务介绍百

O-糖基化位点分析

与N-聚糖不同，O-聚糖是一种较小的高度多样化的支链碳水化合物分子，可附着在不同蛋白结构上。这一特性导致了分析的复杂性，对O-糖基化位点进行分析也十分困难。糖基化位点的可变性是细胞活性的关键指标，血清蛋白糖基化位点附着的减少与先天性糖基化疾病(CDGs)的严重程度之间的相关性证明了这一点。因此，为了充分了解蛋白糖基化对人体健康的影响，准确确定位点占用率具有重要意义。O-糖基化位点分析的一般步骤包括糖蛋白的蛋白水

N-糖基化位点分析

N-糖基化是一种涉及多种生理和病理过程的蛋白翻译后修饰。糖基化修饰位点的可变性是细胞活性的关键指标，血清蛋白糖基化附着位点的减少与先天性糖基化疾病(CDGs)的严重程度之间的相关性证明了这一点。因此，为了充分了解蛋白糖基化对人体健康的影响，准确确定位点占用率具有重要意义。为了确定糖基化附着位点，通常在重水里面使用蛋白n-糖苷酶F（PNGase F）从蛋白质中分离多糖，在此过程中，原先糖基化的天冬酰胺经历脱酰胺化成为

HILIC-UHPLC分析N-聚糖键

糖苷键很少对糖蛋白的功能产生影响，因此通常不需要确定。然而，糖蛋白的聚糖结构高度复杂，评估N-糖的糖苷键的构型和位置对分析糖蛋白的结构是有帮助的。已知有五种常见的N-聚糖键，最常见的是N-乙酰氨基葡糖与天冬酰胺（GlcNAcβ1-Asn）连接。与Asn连接的其他类型包括：哺乳动物和古生菌的层粘连蛋白中的葡萄糖，古生菌中的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc），鼠李糖素细菌。也有报告显示，葡萄糖在甜玉米中与精氨酸连接。HILIC-UHPLC分

糖蛋白分析

糖基化修饰不仅影响蛋白质的空间构想、生物活性、运输和定位，而且在分子识别、细胞通信、信号转导等特定生物过程中发挥着至关重要的作用。随着蛋白药物的迅速发展，单抗药物迅速发展，作为大分子糖蛋白药物，单抗药物的糖基化修饰对其稳定性、有效性和安全性等各方面均有不同程度的影响，因此对其糖基化修饰进行全面表征具有十分重要的意义。对于单抗药物这种大分子蛋白类药物要对能够影响其有效性及安全性的初级或二级结构进行评

PCT-DIA蛋白质组学

PCT（Pressure Cycling Technology）压力循环技术是一项高效的生物样品制备技术，是美国PBI公司开发的一项专利技术。它利用常压和超高（液）压（35,000PSI或更高)之间压力交替循环，可重复地破碎细胞，可实现从各种样品（人类、动物、植物和微生物来源的细胞和组织）中提取蛋白质等重要生物分子。DIA（data-independent acquisition）是基于静电场轨道阱Orbitrap的一种全息式的质谱数据采集模式，是一种数据非依赖型扫描模式。相对