SDS-PAGE检测宿主蛋白HCP残留

SDS-PAGE检测宿主蛋白HCP残留-详情HCP（host cell protein ）宿主细胞蛋白或称宿主蛋白残留，是生物制药过程中来源于宿主生物体的药物产品中的低水平的蛋白质杂质。在重组蛋白药物的表达过程中，宿主细胞系统可以表达许多内源性蛋白质，这些重组生物治疗药物中的宿主细胞蛋白会显著影响药物疗效并引起机体发生免疫反应，存在潜在的风险性，因此必须对这类药物进行严格的质量管控。宿主蛋白残留检测就是检测重组蛋白药物中是否含有

SDS-PAGE检测蛋白质含量

SDS-PAGE检测蛋白质含量-详情蛋白质含量鉴定是蛋白质组学研究中的重要内容，也是进行某些后续分析的前提，如进行差异蛋白的筛选前就必须对蛋白的含量进行精确的鉴定。目前鉴定蛋白质含量的方法主要有经典的凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、双缩脲法、紫外吸收法以及新发展起来的基于质谱的方法等。SDS-PAGE十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳是基于蛋白质分子质量进行蛋白分离的分析技术。根据蛋白质的分子质量将其分离为不同的蛋白条带

O-聚糖的分析策略

O-聚糖的分析策略-详情糖蛋白中的O-聚糖分析是糖组学研究中的重要内容。O糖基化修饰分析研究的主要内容通常包括鉴定发生O-糖基化修饰的氨基酸类型以及该氨基酸在肽链中所处的位置、O-聚糖的结构以及含量等。当前主要利用生物质谱技术结合专一性的糖苷内切酶的作用来实现，分析策略和流程大致包括：（1）O-聚糖的酶解释放；（2）液相色谱纯化富集O-聚糖肽；（3）质谱检测以及数据解析。O聚糖分析第yī步就是利用酶解消化将糖链从糖

n糖基化分子量

n糖基化分子量-详情N糖基化蛋白的相对分子质量为原来蛋白质的相对分子质量加上其共价结合的N糖链的相对分子质量。N糖基化蛋白的相对分子质量在一定程度上可以作为糖链结构鉴定的依据，用于判断糖链的结构正确与否。N糖基化蛋白的相对分子质量可以通过SDS-PAGE、HPLC以及质谱法进行测定。质谱法具有检测结果更加准确、灵敏和直观的优点，已成为各类化合物分子质量分析的强有力工具。基质辅助激光解吸电离飞行质谱（MALDI-TOF-MS）可

N-糖蛋白的糖链鉴别及相对含量测定

N-糖蛋白的糖链鉴别及相对含量测定-详情糖基化修饰是细胞中zuì普遍的翻译后修饰方式之一，通过共价结合糖链影响蛋白的结构、活性以及定位等使蛋白具有多种多样的生物学功能，参与调节不同的生命活动进程。根据所结合的糖链的类型可以将其分为N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化将N-聚糖共价连接到蛋白质特殊氨基酸序列的天冬酰胺残基上，是生物药物尤其是单克隆抗体上zuì广为人知的糖基化形式。 N-聚糖结构通过影响药代动力学、药效学

IP-质谱寻找蛋白质的翻译后修饰

IP-质谱寻找蛋白质的翻译后修饰-详情进行免疫沉淀（IP）后得到的蛋白质可以通过各种方法技术进行进一步的分析，对其基本特征进行表征，如相对分子质量、含量、翻译后修饰方式以及氨基酸序列等。在多种分析方法中质谱技术凭借其高分辨率、高灵敏度以及高准确性等优势已成为IP蛋白分析的有力工具。翻译后修饰（post-translational modifications，PTMs）的IP蛋白在特定的氨基酸位点结合了相应的官能基团，因此相较于没有发生修饰的IP

IP-MS互作蛋白

IP-MS互作蛋白-详情IP-MS（Immunoprecipitation-Mass Spectrometry）即免疫沉淀-质谱联用技术。免疫沉淀技术是一种基于抗体和抗原特异性结合的原理研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法，将细胞裂解液或组织提取液等蛋白混合体系与结合有目的蛋白的磁珠进行孵化，混合体系中能与目的蛋白相互作用的蛋白质通过特异性结合而与其他蛋白组分分离开来，再通过离心或洗脱去掉没有与目的蛋白结合的杂蛋白，从而获得与目的蛋白质相互作用的靶

多肽组学

多肽组学-详情多肽是生物体内天然存在的、由氨基酸组成的、具有生物活性的小分子化合物，如激素、神经递质、抗菌肽、细胞生长因子等。多肽与蛋白质之间没有明显的界限，一般将分子质量小于30kDa的蛋白质称为多肽。多肽组学就是以生物体内的全部多肽为研究对象，对多肽的结构、功能、变化规律以及它们之间的相互关系等进行全面系统的分析，旨在研究不同生理或病理条件下多肽的合成、加工和降解过程，以及其调节基因表达和物质代谢等

免疫沉淀IP

免疫沉淀IP-详情免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）技术是一种基于抗体和抗原特异性结合原理开发的用来检测、分离、纯化蛋白质以及研究蛋白互作的方法。免疫沉淀IP技术利用结合抗体蛋白的磁珠与细胞裂解液或组织提取液中的蛋白混合体系进行孵化，混合体系中的目标蛋白与磁珠上的抗体蛋白发生特异性结合，再通过离心或洗脱去掉没有与抗体蛋白结合的杂蛋白，将目标蛋白分离出来，zuì后结合其他技术（如质谱）可以鉴定目标蛋白的种

转录和蛋白组学

转录和蛋白组学-详情生物体的遗传信息遵循中心表达法则，DNA中包含的遗传信息通过转录传递到mRNA，再通过翻译表达形成具有生物学功能的蛋白质。转录组就是在一定时期或生理条件下机体表达的全部mRNA，蛋白组则是在一定时期或生理条件下机体表达的全部蛋白质。转录组是连接基因组和蛋白组的中间状态。转录组和蛋白组联合分析，就是对转录组数据和蛋白质组数据进行关联分析，获取一定时期内机体mRNA和蛋白的表达情况，利用转录组和蛋

蛋白质的二级结构测定

蛋白质的二级结构测定-详情蛋白质的二级结构是指蛋白质主链折叠产生的由氢键维系的有规则的构象，包括三种zuì主要的结构原件，α螺旋（H）、β折叠子（E）和无规则卷曲（C）。蛋白质的二级结构是联系一级结构和三级结构的桥梁，所以二级结构的预测可为三级结构预测提供很好的起始条件。蛋白质二级结构检测的基本原理就是通过对结构已经测定的蛋白质序列和其二级结构对应关系的统计分析，归纳出一些预测规则，用于待测蛋白的二级结

LC-MS-MS法鉴定磷酸化位点

LC-MS-MS法鉴定磷酸化位点-详情蛋白磷酸化指蛋白质肽链上特定氨基酸共价结合磷酸基团的过程，结合磷酸基团的氨基酸的种类以及其处于多肽链中的位置就称为磷酸化位点。真核生物的磷酸化主要发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸等氨基酸残基上，而原核生物磷酸化主要发生在组氨酸、精氨酸和赖氨酸等残基上。利用液相色谱串联质谱技术LC-MS-MS鉴定磷酸化位点需要先鉴定发生磷酸化的肽段，在此基础上进行磷酸化位点分析。基于LC-MS-MS的磷酸

LC-MS怎么分析蛋白有没有磷酸化

LC-MS怎么分析蛋白有没有磷酸化-详情蛋白磷酸化就是在酶的作用下蛋白质的特定氨基酸共价结合磷酸基团的过程。发生了磷酸化修饰的蛋白质比没有发生修饰的蛋白质分子质量增加了磷酸基团的质量，液相色谱串联质谱技术（LC-MS）就是通过分析这种分子质量变化来判断蛋白是否发生磷酸化修饰。对于一个特定的已知序列得蛋白质，其分子质量是确定的，磷酸基团的分子质量也是已知的，通过质谱检测各肽段的分子质量，若其分子质量刚好增加了

ITS全序列与18S全序列

ITS全序列与18S全序列-详情真核生物rDNA基因编码核糖体RNA（rRNA），rDNA基因由转录区和非转录区组成，转录区包括5S、5.8S、18S和28S rDNA，分别编码5S、5.8S、18S和28S rRNA，在转录区的各rDNA之间还存在一段内转录间隔区ITS。ITS（internal transcribed space）序列是真核生物rDNA基因的内转录区域，存在于18S和5.8S rDNA以及5.8S和28S rDNA之间。其长度和序列在不同种属之间具有一定的多态性，是一段既保守又具有特异

ITS区域全长序列

ITS区域全长序列-详情ITS（internal transcribed space）是存在于真核生物中的一段rDNA转录间隔区。rDNA是编码核糖体RNA（rRNA）的基因，由转录区和非转录区组成，转录区包括18S、5.8S和28S rDNA基因，内转录间隔区ITS位于18S和5.8S rDNA之间以及5.8S和28S rDNA之间。ITS序列长度适中，从酵母到人类的各种真核生物中，ITS的序列长度在300-1000bp之间不等。其序列进化速度快，在不同种属物种之间具有一定的特异性，将其进行PCR扩增

iTRAQ差异蛋白筛选

iTRAQ差异蛋白筛选-详情差异蛋白筛选是差异蛋白组学研究的主要内容之一，主要是筛选不同处理条件下各样本间或同一样本不同时期表达水平存在显著差异的蛋白质，旨在寻找和筛选有意义的差异蛋白，揭示生命活动规律、生物体的调控机理以及响应外界刺激的信号通路等。已知的蛋白含量是进行差异蛋白筛选的前提条件，因此对样本的各蛋白组分进行精确定量至关重要。iTRAQ（同位素标记相对和jué对定量）是一种基于标签的蛋白质质谱定量技

IP胶条测序

IP胶条测序-详情蛋白混合物进行免疫沉淀反应（IP）后，可以得到与目标蛋白相互作用的靶蛋白，此时一般需要对靶蛋白进行进一步的鉴定，如分子量、含量、翻译后修饰以及一级结构表征等，以全面了解靶蛋白的相关信息。凝胶电泳是检测分子量zuì简单的方法，将IP免疫沉淀获得的靶蛋白进行凝胶电泳，电泳结束后蛋白胶条所处的位置对应的Maker的大小就是该靶蛋白的分子质量，此时如还要进行靶蛋白一级结构分析，可以将该蛋白胶条进行回收

HPLC多肽分子量测定

HPLC多肽分子量测定-详情分子量是化合物的基本理化参数，指组成化合物的各原子的相对原子质量之和，也是蛋白质/多肽的重要特征参数之一，在蛋白质/多肽的鉴定中扮演着十分重要的角色，分子质量的正确与否也是判断其结构正确与否的一个重要指标。常用的蛋白质/多肽的分子量鉴定方法包括SDS-凝胶电法、粘度法、凝胶渗透色谱法、凝胶过滤层析法以及质谱法等。凝胶渗透色谱法（Gel Permeation Chromatography，GPC）和凝胶过滤层析法（

HPLC蛋白纯度

HPLC蛋白纯度-详情HPLC（High Performance Liquid Chromatography）高效液相色谱法，也称为高压液相色谱，是一种用于分离、鉴定和量化混合物中的每种成分的分析化学技术。它依靠高压泵将含有样品混合物的液体通过充满固体吸附材料的色谱柱，样品中的每种成分与吸附材料的相互作用略有不同，导致不同成分的流速不同，并导致成分在流出色谱柱时发生分离。蛋白质纯度是蛋白质分析研究中一个重要的理化参数，不纯的蛋白质样本可能会导

免疫共沉淀结合蛋白质质谱

免疫共沉淀结合蛋白质质谱-详情免疫共沉淀技术（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是利用抗体与抗原特异结合的原理研究体内蛋白质相互作用的经典方法。该技术使用非变性剂裂解细胞，保留细胞中蛋白质A-蛋白质B间的相互作用，再将其与蛋白A的专一性抗体混合，此时抗体会与蛋白A结合使其沉淀，同时蛋白B也被共沉淀下来。免疫共沉淀结合蛋白质质谱就是将Co-IP得到的两种蛋白质利用质谱技术进行后续定性和定量分析。Co-IP质谱分析可以用