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交联法蛋白相互作用分析
交联法蛋白相互作用分析-详情生理条件下,大多数蛋白质间相互作用持续时间很短,从而使得相互作用研究变得很困难。交联试剂为这一问题提供了解决方案,即在蛋白质相互作用时将它们共价交联在一起,捕获蛋白质-蛋白质复合物,冻结短暂微弱的相互作用,从而实现对短暂相互作用蛋白的分离和表征。交联过程在体内或体外都可以进行,使用体内还是体外交联取决于项目的需求。两者区别在于,蛋白质在体内交联过程中以天然状态交联,而对于
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蛋白质相互作用质谱分析
蛋白质相互作用质谱分析-详情在过去的几十年中,以质谱(MS)为基础的蛋白质组学已经成为鉴定蛋白质-蛋白质相互作用分析(PPIs)的重要技术。蛋白质通过与其它蛋白质或化合物相互作用,形成大分子化合物,从而发挥生物学功能。对蛋白质相互作用的研究能够帮助我们更好的理解蛋白质。当通过IP, CO IP或GST pull-down等蛋白质相互作用分析手段,获得靶标蛋白后,通过质谱分析方法对该蛋白进行分析,鉴定及定量,能够对相互作用蛋白进行表
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GST pull-down蛋白相互作用分析
GST pull-down蛋白相互作用分析-详情标准的pull-down分析需要带有重组亲和标签的纯化蛋白,该标签具有“诱饵”的功能,并固定在标签特异性亲和配体上。然后将另一种蛋白质或“猎物”蛋白质与“诱饵”蛋白质一起孵育。当这两种蛋白质发生物理相互作用时,“猎物”蛋白质将被“诱饵”蛋白质捕获。之后,取决于亲和配体,可以使用洗脱缓冲液洗脱相互作用的“猎物”蛋白。zuì后,“猎物”和“诱饵”蛋白都可以通过十二烷基硫酸钠-聚丙
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CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析-详情免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)技术是一种通过使用能够与蛋白质结合的抗体从溶液中分离出特定蛋白质的技术,是抗原纯化和检测中使用zuì广泛的方法之一。通过添加不溶形式的抗体结合蛋白(例如与琼脂糖浆液或新近流行的磁珠缀合的蛋白A或Protein G)从溶液中去除抗体-蛋白复合物。免疫沉淀法使用抗原特异性抗体从复合抗原溶液中分离目标抗原,并使用聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE法分析复合蛋白
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蛋白质相互作用分析
蛋白质相互作用分析-详情蛋白相互作用是指两个及以上的蛋白质分子结合形成蛋白质复合体的一个过程。一般情况下蛋白质很难单独发挥作用,都是由多个蛋白质分子的相互协调共同实现复杂的细胞功能。因此专注于蛋白相互作用的研究更加利于探索疾病的发生发展、找寻特定的疾病预测治疗方法,并且在新药研发的研究方面提供新的思路。蛋白质互作分析的方法较多,百泰派克提供蛋白质互作分析服务,及后续基于液质联用技术(LC-MS/MS)对IP
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双向电泳图像分析
双向电泳图像分析-详情二维凝胶电泳技术中要求zuì高,zuì重要的部分,是对得到的蛋白质图像进行分析,图像信息将被比较及自动化分析。比较二维凝胶图像以检测单个样品或不同群体之间蛋白质的定性和/或定量表达变化。二维凝胶的成像分析可以提供各种类型的信息,以检测新型、缺失或修饰的蛋白质,蛋白质斑点的定量,蛋白质斑点的pI和Mr值测定,酶解和质谱检测。蛋白质图像分析为了分析和比较复杂的二维图像,需要使用扫描仪或相机
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2D Blue Native/SDS-PAGE复合物分析服务
2D Blue Native/SDS-PAGE复合物分析服务-详情在生物膜中,许多蛋白质以复合物形式组成。百泰派克生物科技可利用2D Blue Native/SDS-PAGE对这些蛋白质复合物的亚基进行全局分析。2D BN/SDS-PAGE分析中,样品通过蓝色native聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行一维分离,然后通过SDS-PAGE进行二维分离。2D Blue Native SDS-PAGE复合物分析服务蛋白质复合物在时间和空间的所有复杂层面上都可以组织并维持细胞和细胞器的功能,包括细胞
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蛋白质免疫印迹和电转移服务
蛋白质免疫印迹和电转移服务-详情电泳分离的蛋白质从凝胶基质转移或“印迹”到膜(通常是硝酸纤维素或PVDF)上,然后在膜表面进行基于抗体的后续检测,称为蛋白质免疫印迹(Western Blot或immunoblotting)。百泰派克生物科技提供蛋白质免疫印迹分析服务,蛋白质免疫印迹法通过高选择性和高敏感的抗体-抗原相互作用,可用于从复杂蛋白质混合物中检测特定的目标蛋白质,例如组织匀浆或细胞提取物等。所得数据可用于对目标蛋白质进行
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二维凝胶电泳服务
二维凝胶电泳服务-详情二维凝胶电泳(2-DE),即双向电泳,是一种功能强大且使用广泛的方法。二维凝胶电泳是等电聚焦和SDS-PAGE两种方法的结合,先将蛋白质在等电聚焦中通过等电点(pl)进行分离后,再通过SDS-PAGE进行二次分离,根据分子量解析蛋白质。二维凝胶电泳上的每个蛋白质斑点都可以通过高通量质谱法进行洗脱和鉴定。因此,二维凝胶电泳特别适用于比较不同组织、不同条件或对照样品与实验样品之间的蛋白质图谱。百泰派克
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O-糖基化位点分析
O-糖基化位点分析-详情与N-聚糖不同,O-聚糖是一种较小的高度多样化的支链碳水化合物分子,可附着在不同蛋白结构上。这一特性导致了分析的复杂性,对O-糖基化位点进行分析也十分困难。糖基化位点的可变性是细胞活性的关键指标,血清蛋白糖基化位点附着的减少与先天性糖基化疾病(CDGs)的严重程度之间的相关性证明了这一点。因此,为了充分了解蛋白糖基化对人体健康的影响,准确确定位点占用率具有重要意义。O-糖基化位点分析的一般
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N-糖基化位点分析
N-糖基化位点分析-详情N-糖基化是一种涉及多种生理和病理过程的蛋白翻译后修饰。糖基化修饰位点的可变性是细胞活性的关键指标,血清蛋白糖基化附着位点的减少与先天性糖基化疾病(CDGs)的严重程度之间的相关性证明了这一点。因此,为了充分了解蛋白糖基化对人体健康的影响,准确确定位点占用率具有重要意义。为了确定糖基化附着位点,通常在重水里面使用蛋白n-糖苷酶F(PNGase F)从蛋白质中分离多糖,在此过程中,原先糖基化的天冬
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HILIC-UHPLC分析N-聚糖键
HILIC-UHPLC分析N-聚糖键-详情糖苷键很少对糖蛋白的功能产生影响,因此通常不需要确定。然而,糖蛋白的聚糖结构高度复杂,评估N-糖的糖苷键的构型和位置对分析糖蛋白的结构是有帮助的。已知有五种常见的N-聚糖键,zuì常见的是N-乙酰氨基葡糖与天冬酰胺(GlcNAcβ1-Asn)连接。与Asn连接的其他类型包括:哺乳动物和古生菌的层粘连蛋白中的葡萄糖,古生菌中的N-乙酰半乳糖胺(GalNAc),鼠李糖素细菌。也有报告显示,葡萄糖在甜玉米
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糖蛋白分析
糖蛋白分析-详情质谱技术用于糖蛋白分析,可以分析糖型、糖基化位点和蛋白质的定量。百泰派克生物科技提供基于质谱的糖蛋白分析服务。糖蛋白糖蛋白指发生了糖基化修饰的蛋白质,糖基化指碳水化合物通过共翻译或翻译后修饰的方式附着到蛋白质上的过程。分泌的细胞外蛋白常被糖基化。糖蛋白通常是重要的整合膜蛋白,在细胞和细胞的相互作用中发挥作用。糖链可以在细胞中的两个位置处附着到蛋白质上,在内质网一般产生N-糖蛋白,在高
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糖组学分析服务
糖组学分析服务-详情糖组学是指在组学水平上收集、分析和利用糖苷的生物学数据。脂质和蛋白质糖基化的深远生物学效应使糖组学成为生命科学的重要领域。N糖谱分析(对所有聚糖的综合研究)是基因组学和蛋白质组学研究的一个好的补充。在细胞或生物体水平上的糖组学研究可用于提供有关糖组、糖蛋白、脂质或其他类型生物分子的总糖基化模式的一般概述。糖组学分析可用于比较两种糖工程改造的宿主菌株在治疗性糖蛋白生产方面的差异,或
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PCT-DIA蛋白质组学
PCT-DIA蛋白质组学-详情PCT(Pressure Cycling Technology)压力循环技术是一项高效的生物样品制备技术,是美国PBI公司开发的一项专利技术。它利用常压和超高(液)压(35,000PSI或更高)之间压力交替循环,可重复地破碎细胞,可实现从各种样品(人类、动物、植物和微生物来源的细胞和组织)中提取蛋白质等重要生物分子。DIA(data-independent acquisition)是基于静电场轨道阱Orbitrap的一种全息式的质谱数据采集模式,是一种数据
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DIA-PRM蛋白质组学
DIA-PRM蛋白质组学-详情DIA(data-independent acquisition)指数据非依赖型扫描模式,是基于静电场轨道阱Orbitrap的一种全息式的质谱数据采集模式。相对于DDA(数据依赖性的扫描模式),DIA技术将质谱整个扫描范围分为若干个窗口,对每个窗口中的所有离子进行选择、碎裂、检测,具有更好的准确性和可重复性。PRM(parallel reaction monitoring)是一种基于高分辨率和高精度质谱的离子监测技术,是目前靶向蛋白质组学数据采集的主
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细胞表面蛋白质组学
细胞表面蛋白质组学-详情细胞表面蛋白质是一类特殊的蛋白质。它们具有十分重要的功能,如管理细胞功能以及通过转运代谢产物、离子、其他溶质等在细胞与环境之间进行通信。细胞表面蛋白质在不同细胞类型之间有所不同。此外,即使是特定的细胞类型,它也可以在正常或患病状态下发生改变。因此,有许多关于细胞表面蛋白的重要应用,例如区分细胞表型和疾病状态,用于预后和治疗靶标等的研发。细胞表面呈现出各种疾病的关键生物标志物
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外泌体蛋白质组学
外泌体蛋白质组学-详情外泌体蛋白质组学旨在研究外泌体的蛋白质组成,基于质谱的方法可以用于外泌体蛋白质组学的研究。百泰派克生物科技提供基于质谱的外泌体蛋白质组分析服务。外泌体蛋白质组学外泌体是一种由脂质双分子层膜包裹着蛋白质和RNA等细胞分泌物的细胞外囊泡,可分泌自大多数细胞,存在于大多数体液(如血液、尿液、唾液等)和细胞培养液中。外泌体中的蛋白质含量较多,且这些蛋白质涉及的功能范围较广。外泌体蛋白质组
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石蜡包埋样品蛋白质组学
石蜡包埋样品蛋白质组学-详情用于蛋白质组学质谱分析的动物样品主要以新鲜组织、血液、尿液和细胞为主。石蜡包埋的样本,特别是临床上的石蜡包埋样本,具有病史清楚、诊断明确、临床资料详尽等优点,能长期稳定室温保存,对疾病的研究具有jí高的应用价值。因此,针对石蜡包埋样本的蛋白质组学研究,在疾病机理研究、生物标志物发现,尤其是罕见病的研究中具有十分重要的意义。百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion
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样品蛋白质组学
样品蛋白质组学-详情蛋白质组学的常见样品包括细胞样品、组织样品和体液样品。细胞样品包括动物细胞、植物细胞和真菌、细菌等微生物细胞,组织样品包括动物组织和植物组织,体液样品包括血清、血浆和尿液等。此外,蛋白质组学研究的样品可以是来自蛋白质胶点、胶条、IP或Co-IP样品、石蜡包埋样品、外泌体、亚细胞等等。总之,凡是含有蛋白质组的都可以作为蛋白质组学研究的样品。只是,不同的样品用于蛋白质组学研究时所需的制备方
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