在各种非放免疫分析方法中,化学发光免疫分析(CLIA)具有灵敏度高、检测范围宽、精密度好、标记物稳定、可实现全自动化、应用范围广等优点,以吖啶酯衍生物为发光标记物的CLIA的特点是:标记简单、标记物稳定、不需要催化剂、自然本底低、受外界干扰因素少、信噪比高、发光体系简单等。
吖啶酯是吖啶盐的一个总称,指一类可用作化学发光标记物的化学物质,吖啶酯有多个不同的系列,包括吖啶盐DMAE-NHS、吖啶酯NSP-DMAE-NHS、吖啶盐NSP-SA等,接下来将介绍吖啶酯DMAE-NHS的合成方法和性能、优势介绍。
吖啶酯DMAE-NHS合成路线:
1.将4-羟基-3,5-二甲基苯甲酸与N-羟基琥珀酰亚胺溶解在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,在缩合剂的作用下反应得到粗产品,重结晶后得纯产品;
2.将1所得产品1-((4-羟基-3,5-二甲基苯甲酰)氧基)-2,5-吡咯烷二酮与吖啶-9-羰基氯溶解在无水吡啶中,在催化剂的作用下加热反应得到粗产品,柱层析分离提纯。
3.将2所得产物与硫酸二甲酯溶解在无水甲苯中反应,将得到的混合物过滤,滤渣洗涤然后重结晶得到目标产物吖啶酯类化学发光底物DMAE-NHS。
DMAE·NHS的发光性能介绍
1.对DMAE-NHS发光性能的研究表明,DMAE-NHS的发光为闪光,0.4s时发光强度达到最大,发光半衰期约为0.9s,发光强度为6.11×1018cps/mol。发光启动试剂的组成对其发光强度有影响,表面活性剂如CTAC,TritonX-100,Tween-20等能增强其发光。
2.DMAE-NHS与抗体偶联物DMAE-NHS-Ab的发光性能相似,DMAE-NHS与Ab的分子比为2.4时其发光强度为1.8×1019cps/molAb。DMAE-NHS及DMAE-NHS-Ab具有良好的热稳定性,4℃或冰冻下,在pH7.0的PB缓冲液中,半年后它们的发光活性或免疫活性基本没有下降,室温或37’C下,由于水解而降低发光活性,它们的热稳定性随温度升高而降低,随熔液pH值增大而降低,
DMAE-NHS的优势介绍
研究结果表明,DMAE-NHS具有良好的发光性能,易与抗体偶联,偶联物稳定,发光体系简单,是一种理想的化学发光免疫分析标记物,以DMAE-NHS做发光标记物建立的TSHCLIA、TSHBAS-CLIA和TT4BAS-CLIA方法,标准曲线线性好、信噪比高、检测范围宽、具有较高的灵敏度,良好的精密度、准确性和健全性,与IRMA方法及CibaComingCLIA的临床测量值相关性良好。
吖啶酯发光体系优势明显,在体外诊断方面具有更好的灵敏性,目前应用吖啶酯化学发光免疫分析技术已逐渐发展为医药检测、诊断分析、环境检测、食品检测等领域的一种趋势。德晟科技提供质量可靠的吖啶酯、吖啶盐产品,可满足科研机构和试剂盒生产企业的科研、生产需求。